[发明专利]甲基萘醌-7在制备防治缺氧/缺血脑损伤疾病药物中的应用

说明书

本发明公开了甲基萘醌‑7在制备防治缺氧/缺血脑损伤疾病药物中的应用，属于医药技术领域。本发明以星形胶质细胞为切入点，阐明了MK‑7对缺氧/缺血性脑损伤保护作用的分子机制，结果表明，MK‑7通过抑制星形胶质细胞的氧化应激，线粒体功能障碍和炎症反应，改善了低氧诱导的细胞毒性。本发明为临床上防治缺氧/缺血性脑损伤和MK‑7更广泛地应用提供理论支持。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及甲基萘醌-7在制备防治缺氧/缺血脑损伤疾病药物中的应用。

背景技术

星形胶质细胞是大脑中广泛分布的细胞类型，其可以产生营养因子、合成和分泌神经递质、清除毒素，维持大脑的稳态。星形胶质细胞在缺氧/缺血性脑损伤中的病理生理作用最近引起了人们的广泛关注，当缺氧/缺血超过机体耐受水平时，星形胶质细胞受损，产生炎性细胞因子，并能促进邻近神经元死亡，增加对大脑的损伤。因此，寻找有效的治疗损伤星形胶质细胞的药物将为缺氧/缺血性脑损伤提供有价值的贡献。

维生素K-2(vitamin K2,VK2)是一系列被称为甲基萘醌的化合物，其一共有14个异构体；它们有一个共同的核心分子—甲基醌，根据其侧链含有的不饱和异戊二烯基单元的数量进行分类。甲基萘醌-7(menaquinone-7,MK-7)是VK2家族中最佳的生物活性形式，并且其生物利用度最高。

当缺氧/缺血超过机体耐受水平时，星形胶质细胞受损，产生炎性细胞因子，并能促进邻近神经元死亡，增加对大脑的损伤。因此，寻找有效的治疗损伤星形胶质细胞的药物将为缺氧/缺血性脑损伤提供有价值的贡献。在许多国家，MK-7已被用作预防或逆转骨质疏松症和心血管疾病的治疗营养素；但其在缺氧/缺血性脑损伤中的作用未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供甲基萘醌-7在制备防治缺氧/缺血性脑损伤疾病的药物中的应用。

本发明以星形胶质细胞为切入点，通过研究发现MK-7可以增加缺氧星形胶质细胞的活力和增殖。同时，MK-7可以使星形胶质细胞在低氧条件下的形态趋于正常；MK-7可以通过平衡ROS的产生和优化ATP的生成来逆转线粒体功能障碍，从而减少缺氧诱导的星形胶质细胞氧化应激损伤；MK-7可以减少缺氧星形胶质细胞中促炎细胞因子和趋化因子的表达。由此推断，MK-7为缺氧星形胶质细胞提供了一种有希望的保护治疗，并可能有助于缺氧/缺血性脑损伤。

进一步地，本发明还阐明了MK-7对缺氧/缺血性脑损伤保护作用的分子机制。缺氧导致星形胶质细胞的Gas6表达降低，但MK-7预处理可明显增加Gas6水平；在缺氧条件下，Gas6与MK-7具备的星形胶质保护作用紧密相连，用siRNA沉默星形胶质细胞的Gas6表达，可明显减弱MK-7对星形胶质细胞的保护作用。

在本发明中确定了MK-7可以保护缺氧诱导的星形胶质细胞损伤，并探讨了其作用机制，为临床上防治缺氧/缺血性脑损伤和MK-7更广泛地应用提供理论支持。

附图说明

图1为实施例1中MK-7促进缺氧星形胶质细胞存活和增殖的结果。原代星形胶质细胞在低氧条件下培养4、6、8和12h，用CCK-8法(A)或BrdU法(B)测定细胞活力和增殖。在常氧条件下，用增加MK-7浓度的方法对星形胶质细胞进行72h的预处理，然后分析细胞活力(C)和增殖(D)。用CCK-8法(E)或BrdU法(F)检测低氧条件下MK-7预处理星形胶质细胞的细胞活力和增殖。G.原代星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的免疫荧光(标尺：200μm)。H.在常氧或低氧条件下培养12h的星形胶质细胞在150μM MK-7预处理30h的存在或不存在下的形态学改变的代表性图像(标尺：200μm)。注：*p0.05，**p0.01，***p0.001与常氧组比较；#p0.05，##p0.01与单独缺氧处理的细胞相比；n＝6个独立实验。