[发明专利]一种采用细胞移植作为载体的生物膜材料

权利要求书

1.一种采用细胞移植作为载体的生物膜材料，其特征在于，所述一种采用细胞移植作为载体的生物膜材料制备方法包括以下步骤：

S1：原材料准备：

1)足月顺产人胎儿羊膜，

2)1％～8％浓度的氨水，

3)抗菌素，

4)平衡盐液，

5)0.2％～0.4％浓度的胰酶溶液，

6)5％～15％浓度的PLLA溶液，

7)含血清5％～120％的DMEM培养液，

8)Co60放射源；

S2：选取无传染病及系统性疾病的健康适龄产妇第一胎产后30min～120min内的胎盘；

S3：无菌条件下将羊膜自胎盘上钝性分离；

S4：将羊膜置于平衡盐溶液中，摇动振洗3次，每次5min，洗去血污及粘液，取出膜，置于平衡盐溶液中，-10℃～-50℃冻存，备用；

S5：37℃恒温摇床解冻；

S6：将解冻之膜置于1％～8％浓度的氨水中摇动振洗3次，每次10min；

S7：换用PBS溶液清洗直至无泡沫为止，此时膜呈洁白半透明状；

S8：按需求将膜分切成不同规格(大小、形态)，置于一次性冻存管中(加PBS抗菌素液)密封保存，登记规格、时间；

S9：Co60γ射线(6,000,000rads)照射灭菌，并降低抗原性；

S10：-10℃～-50％冻存备用；

S11：依需求按登记规格取出，于37℃解冻；

S12：解冻后取出膜，置于0.2％～0.4％浓度的胰酶(1V)溶液中20cm2/2ml、37℃环境保持3小时，此时膜一面变为涕状胶样物，一面仍韧而密实。以含5％～20％血清的DMEM培养液终止消化。用显微外科镊将两层结构分开，弃去胶状物，韧而密实地一层既是所要组织；

S13：用玻璃片捞取膜，将之去细胞面向上，平铺于以培养液湿润过的塑料培养皿底部，置于无菌操作台中风干；

S14：表面涂布薄层5％～15％浓度的PLLA溶液，风干；

S15：生物膜制备完成，经紫外线照射2小时消毒后，即可用于接种胚胎干细胞。

2.根据权利要求2所述的一种采用细胞移植作为载体的生物膜材料，其特征在于，所述抗菌素包括：青霉素、克拉霉素、克林霉素。

3.根据权利要求2所述的一种采用细胞移植作为载体的生物膜材料，其特征在于，所述平衡盐液为0.9％NACL溶液。