[发明专利]基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法和应用

权利要求书

1.一种基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将六水三氯化铁溶解在乙二醇中，边搅拌边加入柠檬酸钠，最后加入醋酸铵，室温下磁搅拌1-3h后置于180-250℃条件下保温15-20h，冷却，再采用磁分离法收集沉积物，并用乙醇和去离子水清洗3-5次，最后再次磁分离，制得超顺磁性四氧化三铁纳米粒子；

S2.培养巨噬细胞；

S3.移除S2培养的巨噬细胞中的原培养液，用磷酸盐缓冲液清洗3-5次，然后加入含有S1所得超顺磁性四氧化三铁纳米粒子和柠檬酸钠的无血清DMEM培养基，孵育2-3h，去除原培养基，用无血清DMEM培养基清洗3-5次；

S4.向S3所得巨噬细胞中加入无血清DMEM培养基继续培养40-55h；

S5.取S4培养容器中的上清液，用无血清DMEM培养基清洗2-3次后离心，弃去沉淀并保留上清液，然后进行磁分离，收集磁分离产物，用磷酸盐缓冲液清洗3-5次，即得。

2.根据权利要求1所述的基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法，其特征在于，所述六水三氯化铁、柠檬酸钠和醋酸铵的质量比为2-3:1:8-9。

3.根据权利要求1所述的基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法，其特征在于，所述S2具体培养方式为：采用含有10wt％胎牛血清和1wt％链霉素-青霉素的DMEM培养基培养巨噬细胞，培养过程中将细胞置于37℃、5％CO₂的培养箱中，培养40-55h。

4.根据权利要求1所述的基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法，其特征在于，所述S2中巨噬细胞为小鼠巨噬细胞J774A.1、P338D1、S774A.1或RAW264.7。

5.根据权利要求1所述的基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法，其特征在于，所述S3中超顺磁性四氧化三铁纳米粒子的浓度为0.2-0.3mg/mL,柠檬酸钠的浓度为1.2-1.35mg/mL。

6.根据权利要求1所述的基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法，其特征在于，所述S5中离心条件为800-3000rpm离心3-15min。

7.根据权利要求1所述的基于巨噬细胞释放仿生磁性囊泡的方法，其特征在于，所述S3-S5的培养过程中，培养条件均为37℃、5％CO₂。

8.采用权利要求1-7中任一项所述的方法得到的仿生磁性囊泡。

9.权利要求8所述的仿生磁性囊泡在制备医用材料方面的应用。