[发明专利]一组用于预测2019冠状病毒病免疫检查点风暴的标志物、应用及其试剂盒

说明书

本发明提供了一组用于预测2019冠状病毒病免疫检查点风暴的标志物，及其应用、试剂盒和试剂盒的制备方法，属于生物医药技术领域。本发明所述标志物包括BTLA、GITR、HVEM、IDO、LAG‑3、PD‑1、PD‑L1、TIM‑3、CD28、CD80、4‑1BB、CD27和CD152中一种或两种以上。利用本发明提供的生物标志物或者其制备得到的试剂盒进行2019冠状病毒病(COVID‑19)免疫检查点风暴的预测，具有检测快速、准确、费用低等优点，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一组用于预测2019冠状病毒病免疫检查点风暴的标志物及应用和试剂盒的制备方法。

背景技术

随着2019冠状病毒病(COVID-19)在全球持续蔓延，相关疫情已经演变成为一场全球性的公共卫生危机。除呼吸困难、低氧血症、急性呼吸窘迫和细胞因子释放综合征外，进行性淋巴细胞减少(尤其是T细胞)是重症COVID-19的一个显著临床特征。最近，一些研究发现，在重症COVID-19病例中，T细胞缺失与T细胞上几种抑制性检查点分子表达增加存在相关性。在各种慢性病毒感染和肿瘤患者中抑制性检查点分子被证明是调控T细胞衰竭的关键因素。最近的研究进一步表明，抑制检查点分子在急性病毒感染(如埃博拉病毒或汉坦病毒感染)的病理生理学中发挥着关键作用。抑制检查点的可溶性亚型可通过膜结合蛋白的裂解或mRNA的选择性剪切产生，并竞争性地调节其膜结合蛋白的功能。因此，开发出能够预测COVID-19的免疫失衡和区分患者严重程度的可溶性检查点分子标志物具有重要意义。

重症病人的血浆中，巨噬细胞、中性粒细胞趋化因子、促炎细胞因子和抗炎细胞因子比普通流感病人要高。病毒侵犯人体后，体内免疫细胞迅速、大量释放细胞因子，产生“自杀式”效应，全身的炎症反应加强，造成疾病重症化发展。同时重症病例体内病毒特异性的T细胞过度活化后耗竭，免疫应答水平下降，从而机体的抗病毒能力降低。然而，目前并没有预测患者的免疫检查点风暴发生的生物标志物。

发明内容

本发明的目的在于提供一组用于预测2019冠状病毒病(COVID-19)免疫检查点风暴标志物及其应用、试剂盒和试剂盒的制备方法。

本发明提供了一组用于预测2019冠状病毒病(COVID-19)免疫检查点风暴标志物，所述标志物包括BTLA、GITR、HVEM、IDO、LAG-3、PD-1、PD-L1、TIM-3、CD28、CD80、4-1BB、CD27和CD152中的一种或两种以上。

根据本发明所述的生物标志物，其中作为优选地，所述2019冠状病毒病(COVID-19)包括2019新型冠状病毒肺炎以及2019新型冠状病毒导致的其他脏器损伤型疾病。

本发明还提供了上述技术方案所述的标志物在制备用于预测2019冠状病毒病(COVID-19)免疫检查点风暴的试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种用于预测2019冠状病毒病(COVID-19)免疫检查点风暴标志物的试剂盒，所述试剂盒中包括：分别包被有BTLA、GITR、HVEM、IDO、LAG-3、PD-1、PD-L1、TIM-3、CD28、CD80、4-1BB、CD27和CD152中的一种或两种以上的捕获抗体的编码微球，生物素分别标记的BTLA、GITR、HVEM、IDO、LAG-3、PD-1、PD-L1、TIM-3、CD28、CD80、4-1BB、CD27和CD152中的一种或两种以上的检测抗体，链霉亲和素标记的藻红蛋白。

本申请对试剂盒中各组分含量不做特别限定，本领域技术人员可以根据检测的实际情况进行组分含量的配比调整。进一步，优选地，本申请试剂盒的各组分相同体系下的用量关系如下：

羧基微球：0.4×10⁶～1.6×10⁶个；