[发明专利]一种H7N9病毒特异性识别抗体P51C05及检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种H7N9病毒特异性识别抗体P51C05及检测试剂盒，所述抗体的氨基酸序列中，重链CDR1:GYTFTSYT，CDR2:INTNTGNP，CDR3:ARGVYGMDV，轻链CDR1:QTVSNY，CDR2:DAS，CDR3:QQRYNWPLT。本发明的抗体P51C05为人源单克隆抗体，能够特异性识别H7N9流感病毒抗原，具有高亲和力和高特异性，可有效解决目前临床诊断上普遍存在的假阳性情况，为流感病毒的防控提供准确的检测结果。

技术领域

本发明涉及病毒诊断技术领域，具体涉及一种N7N9病毒的特异性识别抗体，命名为P51C05，以及含该抗体的检测试剂盒。

背景技术

急性呼吸道感染是人类最普遍的感染性疾病。多数呼吸道感染是由病毒引起的，临床上常见的病原体有腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞体病毒和鼻病毒，而支原体和衣原体均为呼吸道致病细菌。由于针对不同细菌和病毒感染采取的治疗方案有所不同，所以在感染后就需要尽快做出诊断。同时由于高致病性流感病毒的强传播性和高致死性，需对其进行严格的隔离与防护。由于一般的临床诊断方法不能鉴别病原体的差别，因此就需要采取准确可靠的实验室方法进行病原体的鉴别诊断。

为实现针对流感病毒抗原的检测，需要得到针对流感病毒的高亲和力抗体，目前市场上的检测抗体多为动物来源，例如：杂交瘤技术发展出的鼠源抗体和兔源抗体。但由于人血清成分的复杂性，因此很容易产生假阳性的检测情况，即未感染病毒的血清仍可能存在针对鼠源或兔源抗体的抗体，这时的血清学诊断结果即为假阳性。这将为临床未发病的疑似病例诊断带来很大的困难。为了解决这一问题，目前已有方案是对得到的鼠源抗体或兔源抗体进行种属改变，即对其进行人源化，但在这过程中，将大概率会导致抗体的亲和力和特异性的严重丢失，最终得到的人源化抗体也失去了其应用的价值。因此我们利用噬菌体展示技术，筛选针对流感病毒抗原的人源的高亲和力和高特异性的单克隆抗体用于临床的诊断。

发明内容

本研究通过构建人源抗体的噬菌体展示文库，筛选针对流感病毒H7N9抗原的高亲和力和高特异性的人源单克隆抗体，用于临床的诊断，以解决目前临床诊断上普遍存在的假阳性情况，为流感病毒的防控提供准确的检测结果。

下面详述本发明的技术方案：

第一方面，本发明提供了一种H7N9病毒特异性识别抗体P51C05，重链及轻链的决定簇互补区(complementarity-determining region，CDR)氨基酸序列如下：

决定簇互补区为高变区，是抗体与抗原的结合位置，CDR3具有更高的高变程度，重链在于抗原结合中起重要的作用。

第二方面，本发明提供了上述抗体P51C05的编码基因。

优选的，上述编码基因中，重链核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，轻链核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

第三方面，本发明提供了含上述编码基因的载体。

第四方面，本发明提供了含上述编码基因的宿主细胞。

第五方面，本发明提供了上述抗体P51C05在制备H7N9病毒的诊断试剂中的应用。

第六方面，本发明提供了一种H7N9病毒特异性检测试剂盒，含有上述抗体P51C05。

优选的，上述检测试剂盒中，还含有包被有抗体P51C05的微孔板，经修饰的抗体P51C05作为二抗、缓冲溶液、样品稀释液、显色液、阴性对照血清和阳性对照液。缓冲溶液、样品稀释液、显色液和阳性对照液等均采用本领域常规试剂即可，无特殊成分要求。例如，缓冲溶液和样品稀释液可使用PBS，酶标二抗可以采用HRP标记，使用TMB显色液或ABTS显色液。阳性对照液中含有H7N9灭活抗原和PBS。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：