[发明专利]牛疱疹病毒抗原组合物及其应用

说明书

本发明涉及一种牛疱疹病毒抗原组合物及其应用，包括以下蛋白中的至少两种：氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的牛疱疹病毒重组gB蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的牛疱疹病毒重组gD蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的牛疱疹病毒重组gH蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的牛疱疹病毒重组gL蛋白。本发明综合分析了牛疱疹病毒的gB蛋白、gD蛋白、gH蛋白和gL蛋白的序列信息和空间结构，并对四种蛋白分别进行了定点突变，提高了蛋白各自的免疫原性，能够更好地激发中和抗体，免疫效果更好，免疫期限更长。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，特别是涉及一种牛疱疹病毒抗原组合物及其应用。

背景技术

牛传染性鼻气管炎（Infectious Bovine Rhinotracheitis，IBR）是由牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus，IBRV）感染所引起的高度接触性传染病。该病引起的临床症状主要有呼吸困难、鼻炎、发热、食欲不振、结膜炎、乳房炎、流产、龟头包皮炎、外阴阴道炎及全身系统性感染等。IBRV可在脊神经节内和三叉神经节内发生潜伏感染，感染牛可存在隐性感染，因不表现任何临床特征而被忽视，但是隐性感染的牛会不停地向外界排毒，造成其他易感牛群的感染。一般康复的病牛亦是如此，病毒在体内潜伏，当外界环境变化时会刺激机体的病毒进一步活化，所以一旦该病发生将很难从牛群中消除，其流行和危害有增无减，给养牛业造成巨大的经济损失。世界动物卫生组织（OIE）将该病定义为B类疫病，我国农业部在动物疫病名录中将其列为二类动物疫病。

IBRV又称牛疱疹病毒I型（Bovine Herpesvirus 1，BHV-1），属于疱疹病毒科、α疱疹病毒亚科。IBRV是有囊膜的线性双链DNA病毒，约135~140kb，病毒直径为120~220nm，粒子似球形，衣壳为正二十面体对称。IBRV基因组由一个长独特区（UL，106kb）和一个短独特区（Us，10kb）及Us区两侧的重复序列IRs和TRs组成。IBRV编码的结构蛋白有33种，其中13种蛋白与核衣壳有关，10种进行编码糖蛋白。在这10种糖蛋白中，6种是在长的独特序列区，分别被命名为gK（UL53）、gC（UL44）、gB（UL27）、gH（UL22）、gM（ULl0）及gL（ULl），剩下的四种位于短的独特序列区，被命名为gG（US4）、gD（US6）、gI（US7）和gE（US8）。目前已知疱疹病毒侵入细胞至少需要4种糖蛋白的参与，即gB、gD、gH和gL蛋白。gB蛋白与病毒吸附和渗透宿主细胞有关，可同时诱导机体产生体液免疫和细胞免疫，是诱导机体产生免疫应答的主要抗原蛋白之一。gD蛋白位于病毒囊膜及感染细胞的表面，是病毒复制所必需的，与病毒穿透、进入宿主细胞有关，可同时诱导机体产生体液免疫和细胞免疫。gH蛋白与gL蛋白形成的异质二聚体gH-gL，在疱疹病毒侵入宿主细胞、病毒与细胞或细胞与细胞之间的融合以及病毒在细胞间传播的过程中都是必不可少的。

目前，全球对于IBR的控制主要采取扑杀和疫苗接种两种方式，但扑杀耗资巨大，而一般的疫苗也存在免疫效果较差、免疫期限较短等问题。

发明内容

基于此，有必要提供一种免疫效果较好、免疫期限较长的牛疱疹病毒抗原组合物。

一种牛疱疹病毒抗原组合物，包括以下蛋白中的至少两种：氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示的牛疱疹病毒重组gB蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的牛疱疹病毒重组gD蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的牛疱疹病毒重组gH蛋白和氨基酸序列如SEQ IDNO:4所示的牛疱疹病毒重组gL蛋白。

在其中一个实施例中，包括所述牛疱疹病毒重组gB蛋白、所述牛疱疹病毒重组gD蛋白、所述牛疱疹病毒重组gH蛋白和所述牛疱疹病毒重组gL蛋白。

在其中一个实施例中，所述牛疱疹病毒重组gB蛋白和所述牛疱疹病毒重组gD蛋白形成异二聚体，所述牛疱疹病毒重组gH蛋白和所述牛疱疹病毒重组gL蛋白形成异二聚体。