[发明专利]一种评价保健品辅助保护肝脏功效的方法

说明书

本发明涉及保健品功效评价技术领域，针对现有的哺乳动物模型评价保健品护肝效果无法同时进行多个供试品评价的缺陷，公开一种评价保健品辅助保护肝脏功效的方法，以斑马鱼为受试对象，将斑马鱼置于乙醇中模拟人酗酒伤肝状态，设置模型对照组、阳性对照组和供试品组、正常对照组，通过分析肝脏肿大改善作用、肝脏变性改善作用和卵黄囊吸收延迟改善作用三个指标，并设置阳性对照组来评价保健品的功效，评价结果准确，而且斑马鱼单次产卵数量多，同一亲本的子代差异性小，因此能够满足多个供试品的批量测试和统计学要求，有效消除个体差异，并且评价时间缩短，斑马鱼试验成本也更低，操作过程更加简洁，所以适合实验室评价使用。

技术领域

本发明涉及保健品功效评价技术领域，具体涉及一种评价保健品辅助保护肝脏功效的方法。

背景技术

肝脏是是人体中最大的消化腺和解毒器官。外来的或体内代谢产生的有毒物质都要经过肝脏处理，使毒物成为比较无毒的或溶解度大的物质。当肝脏因病原体感染、中毒、药物或营养不良等原因而造成损害时将造成代谢障碍，导致一系列病理改变，对人体康危害极大。而现代社会人群的高强度工作、休息时间不规律与不充分以及过度饮酒等也造成肝损伤。针对肝脏防护的重要性，目前市场上出现了多种护肝产品或者保健品，如甘草酸制剂、水飞蓟素等，种类繁多，申请人也受到部分研发企业等的委托对研发的护肝产品的功效进行评价。

目前评价保健品护肝效果的方法主要是采用哺乳动物模型(小鼠或大鼠)，采用成年小鼠或大鼠，单一性别，大鼠(180～220g)，每组8～12只。小鼠(18～22g)，每组10～15只，以人体推荐的10倍(大鼠)或5倍(小鼠)为其中一个剂量组，另设二个剂量组。用无水乙醇造成肝损伤模型，受试样本给予时间为30天，必要时可延长至45天。每日经口灌胃给予受试样品，动物每周称重两次，按体重调整受试样品剂量。处理结束动物禁食16h后处死，评价指标为：肝组织中丙二醛(MDA)，还原型谷胱甘肽(GSH)，甘油三酯的含量(TG)。

但是现有的评价方法采用酒精灌胃同时喂以营养丰富的食物，但大鼠厌倦酒精，不能确保大鼠有较恒定酒精摄入，操作复杂而且技术性较强，同时哺乳动物个体差异性大，评价结果受到影响，而且供试品的给予时间一般为30～45天，实验周期太长，花费多，且受限于哺乳动物饲养成本高、发育周期长等特点无法同时进行多个供试品的评价。

发明内容

针对现有的哺乳动物模型评价保健品护肝效果无法同时进行多个供试品评价的缺陷，本发明的目的在于提供一种评价保健品辅助保护肝脏功效的方法，能够实现多个供试品的同时评价，对供试品效果做出横向比较，且评价结果受个体差异影响较小，更加准确稳定。

本发明提供如下的技术方案：

一种评价保健品辅助保护肝脏功效的方法，包括以下步骤：

(1)设置正常对照组：以斑马鱼为受试对象，置于水中培养；

(2)设置模型对照组：取与步骤(1)同规格的斑马鱼置于肝损伤诱导剂试液中培养；

(3)设置供试品组：取与步骤(1)同规格的斑马鱼置于肝损伤诱导剂试液中培养，并以溶解方式加入待测保健品；

(4)检测：培养相同的时间后，取正常对照组、模型对照组和供试品组的斑马鱼在解剖显微镜下拍照并保存图片，采用图像处理软件图像分析，基于统计学方法计算斑马鱼肝脏肿大改善作用、肝脏变性改善作用和卵黄囊吸收延迟改善作用；

(5)评价：当斑马鱼肝脏肿大改善作用、肝脏变性改善作用和卵黄囊吸收延迟改善作用为正值，且显著性差异水平p＜0.05时，判断待测保健品具有辅助肝脏保护功效，否则判断为无辅助肝脏保护功效或辅助肝脏保护功效不明显。