[发明专利]YKL-40shRNA在治疗哮喘病中的应用

说明书

本发明涉及分子生物学技术领域，具体是YKL‑40shRNA在治疗哮喘病中的应用。本发明通过携带CHI3L1基因的腺病毒shRNA干扰载体转染哮喘小鼠，局部干扰YKL‑40的表达，实验结果表明局部干扰YKL‑40的表达，YKL‑40shRNA抑制了小鼠肺组织YKL‑40的表达，并有效减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞浸润、气道高反应性和气道粘液分泌，达到有效治疗哮喘病的目的。其优点表现在：本发明首次提出了靶向YKL‑40治疗哮喘病的新思路，为该类患者提供了新的治疗方向，实用性强。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，具体地说，是YKL-40shRNA在治疗哮喘病中的应用。

背景技术

支气管哮喘是最常见的慢性呼吸系统疾病之一，是由多种细胞和细胞组分参与的慢性气道炎症性疾病。目前，临床上针对哮喘的治疗药物主要有糖皮质激素、β2受体激动剂、抗胆碱药、抗组胺药、白三烯调节剂等等，根据患者病情分阶梯治疗。尽管目前以糖皮质激素为主的哮喘综合治疗能使大部分患者的病情得到较好的控制，但仍有部分患者存在激素抵抗或者激素不敏感，从而导致哮喘症状控制不佳。变应原特异性免疫治疗可以用于不愿接受长期药物治疗或不能耐受药物不良反应的患者，但可能会进一步诱发全身性过敏反应。对于一些常规控制性药物控制不佳的中重度哮喘患者，目前也有支气管热成形术、生物治疗(如抗IgE单抗、抗IL-4单抗、抗IL-13单抗或抗IL-5Rα)等疗法，但这些治疗方法也存在治疗成本高昂等缺陷。故寻求哮喘治疗新靶点以改善哮喘症状、肺功能，提高生活质量，具有重要的意义。

在基因干扰研究中，基因短发夹RNA(shRNA)是目前常用的用来诱导RNA干扰(RNAi)的小片段非编码RNA。相较于小干扰RNA(siRNA)，其可以诱导出更为稳定的RNAi效果。通过重组入腺病毒质粒载体中，诱导细胞内与之同源的mRNA的降解，从而达到抑制特定基因表达的作用。目前，有学者对RNAi在肿瘤性疾病、感染性疾病以及呼吸系统疾病等多种疾病中的作用进行研究，证实了RNAi作为一种基因沉默技术的优点和可靠性，也开展了多项RNAi相关的基因治疗临床实验。腺病毒载体目前在基因治疗领域被广泛应用，其转染效率高，对分裂期细胞和非分裂期细胞均具有感染能力，瞬间表达，安全性好。既往研究表明，YKL40在嗜酸性粒细胞性哮喘中表达水平增高，可作为哮喘的诊断标志物。

本研究通过携带CHI3L1基因的腺病毒shRNA干扰载体转染哮喘小鼠，局部干扰YKL-40的表达，观察其对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞炎症及相关细胞因子表达的影响。实验结果表明局部干扰YKL-40的表达，发现YKL-40shRNA抑制了小鼠肺组织YKL-40的表达，并有效减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞浸润、气道高反应性和气道粘液分泌。这提示YKL-40shRNA在支气管哮喘中有潜在的治疗价值。提供了靶向YKL-40治疗哮喘的新思路，这可能在哮喘临床治疗中拥有广阔前景^[1,2]。

参考文献：

[1]中国过敏性哮喘诊治指南(第一版,2019年)[J].中华内科杂志,2019(09):636-655.

[2]王东辉,张方.重症支气管哮喘的诊治进展[J].中华肺部疾病杂志,2019,12(05):638-641.

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种靶向YKL-40治疗哮喘的新思路。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一方面，本发明提供了YKL-40在制备治疗哮喘病的药物中的应用。

另一方面，本发明还提供了YKL-40抑制剂在制备治疗哮喘病的药物中的应用。

进一步地，本发明还提供了YKL-40抑制剂在制备减轻气道嗜酸性粒细胞浸润、气道高反应性和气道粘液分泌的药物中的应用。

优选地，所述的YKL-40抑制剂是降低YKL-40表达量的物质。