[发明专利]一种检测多氯联苯的试纸条及其应用

说明书

本发明公开了一种检测多氯联苯的试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，所述反应膜上具有包被有多氯联苯半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有多氯联苯单克隆抗体‑胶体金标记物。本发明还提供了一种应用上述多氯联苯试纸条检测饲料中多氯联苯残留的方法。本发明所提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。

技术领域

本发明涉及一种检测多氯联苯的试纸条及其应用，具体涉及一种用于检测多氯联苯的胶体金试纸条，其特别适用于饲料中多氯联苯残留的检测。

背景技术

多氯联苯作为工业化学品被生产，属于卤代芳烃，是苯环上的碳原子连接的氢原子在不同程度上被氯原子取代的一类联苯化合物。多氯联苯属于内分泌干扰物类环境激素物质，对动物和人类的生殖系统、神经系统和免疫系统具有危害作用，易溶于生物体的脂肪组织中，还可以通过食物链浓缩富集。2001年5月，PCBs被列为《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》中十二种特别有害的持久性有机污染物之一，是目前已检测到的环境污染物中最具致癌性的物质之一。研究证明多氯联苯存在于环境中，污染环境、威胁人类健康，世界上绝大多数国家已停止多氯联苯的生产和使用。然而，世界上许多地方的生态系统中仍然有多氯联苯的存在，该物质相当稳定、不易降解，会长期存在于环境中。

检测多氯联苯的方法有气相色谱法、气相色谱-串联质谱法、生物传感器法等。与上述方法相比，免疫化学检测法对药物检测具有快速、特异、灵敏、准确、可以批量监测、样品处理简单、能实现自动化操作等优点。而免疫化学法检测多氯联苯的前提是需要具备针对多氯联苯的抗体，本申请发明了多氯联苯人工抗原制备方法，并将其应用于快速检测试纸条中，用时短，操作简单，成本较低，适用于基层单位大批量地检测样品。

发明内容

本发明的目的是提供一种灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短的多氯联苯残留检测试纸条。

本发明所提供的检测多氯联苯残留的试纸条，包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)；所述反应膜上具有包被有多氯联苯半抗原-载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有多氯联苯单克隆抗体-胶体金标记物。

所述多氯联苯半抗原-载体蛋白偶联物是由多氯联苯半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白。

所述多氯联苯单克隆抗体是以多氯联苯半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，是由多氯联苯单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得；所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。

所述样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)依次粘贴在底板(7)上，所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述底板可为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；所述样品吸收垫可为吸滤纸或滤油纸；所述结合物释放垫可为玻璃棉或聚酯材料；所述吸水垫为吸水纸；所述反应膜可为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸条的方法，其包括步骤：

1)制备喷涂有多氯联苯单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

2)制备具有包被有多氯联苯半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；

3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

具体地说，步骤包括：

1)半抗原制备：将多氯联苯PCB118与N，N-二甲基甲酰胺等物质经过一系列化学反应得到多氯联苯半抗原；