[发明专利]一种双齿围沙蚕蛋白源ACE抑制肽的制作方法

权利要求书

1.一种双齿围沙蚕蛋白源ACE抑制肽的制作方法，包括以下步骤：

(1)粉碎沙蚕，脱脂处理；

(2)提取沙蚕蛋白：将预处理好的脱脂双齿围沙蚕粉采用1mol/L的稀碱溶液浸提60min，温度控制在50-60℃，pH调整到8，然后离心除去底层不溶物，取上清液，用盐酸调节pH到双齿围沙蚕蛋白的等电点4.5，静置后使得蛋白质得到充分凝集后初步形成沉淀，再次离心过滤除去上清液，得到沉淀蛋白质，再将pH为4.5的沉淀反复加入蒸馏水洗涤，将沉淀的pH调节到7.0为止，将所得沉淀蛋白质充分预冻后放入冷冻干燥机中采用冷冻干燥法将沉淀蛋白质干燥至恒重，得到双齿围沙蚕蛋白冻干粉，冷冻备用；

(3)对沙蚕蛋白酶解处理：称取沙蚕蛋白冻干粉，选取碱性蛋白酶配成酶解液，对沙蚕蛋白冻干粉水解4h，水解结束后经高温灭酶，然后离心取上清液，检测各自酶解产物的ACE抑制率，抑制率越高说明酶解效果越好；

碱性蛋白酶水解沙蚕蛋白时，固液比为1:6～1:14g/mL，酶解液的pH值为6～14，酶解温度为40～60℃；

(4)筛选高活性分子量片段：将离心过后的酶解液透过超滤膜，得到不同分子质量的分离产物；

酶解液透过超滤膜时，超滤膜的大小为1～10kDa。