[发明专利]一种金簇功能化铜钴材料检测肺癌的电致化学发光传感器的制备方法

说明书

本发明涉及一种金簇修饰铜钴材料检测CYFRA21‑1的电化学发光传感器的制备方法。本发明以电沉积铂纳米粒子作为基底材料，金簇修饰铜钴材料Cu₂O@CuCo₂O₄作为二抗标记物，并且Cu₂O@CuCo₂O₄作为共反应促进剂，采用共反应促进剂型信号放大策略，构建了信号增强型ECL传感器，实现了在2 fg/mL～50 ng/mL线性范围内对CYFRA21‑1的灵敏检测，检测限为0.67 fg/mL。

技术领域

本发明涉及一种发光金簇（AuNCs）功能化铜钴纳米材料检测肺癌标记物CYFRA21-1的电致化学发光传感器的制备方法。具体是采用铜钴纳米材料的复合物作为传感平台，将金纳米团簇作为发光体负载在铜钴纳米材料的复合物的表面，制备了一种CYFRA21-1的信号增强型电化学发光传感器，属于电化学发光传感器领域。

背景技术

细胞角蛋白(CK)是构成细胞骨架的一类中间丝状物,有多种类型,其中以细胞角蛋白19(CKl9)片段CYFRA21-1在恶性肿瘤诊断中最为重要。CYFRA21-1是细胞角蛋白19片段，由细胞结构中主要成分细胞角蛋白19的两个单克隆抗体组成，主要存在于肺癌、食道癌等上皮起源的肿瘤细胞的胞浆中，肺腺癌、肺鳞癌均有CYFRA21-1的表达，当细胞发生癌变时，由于肿瘤细胞的坏死溶解而使CYFRA21-1释放使血中含量增高。CYFRA21-1目前被认为是一种主要用于检测肺癌的肿瘤标记物，尤其对非小细胞肺癌的诊断具有重要价值。如果肺部存在不清晰的环形阴影，同时血清CYFRA21-1浓度30ng/ml，原发性支气管肺癌的可能性非常高。CYFRA21-1的血清浓度水平高低与肿瘤临床分期正相关，也可作为肺癌手术和放化疗后追踪早期复发的有效指标。因此，CYFRA21-1的高灵敏检测非常重要。

电化学发光（Electrochemiluminescence，ECL）结合了电化学电位可控和化学发光高灵敏度的特点，已经发展成为一种极具应用潜力的分析方法。作为一种新型的金属纳米材料，金纳米团簇不但具有传统量子点优越的光学性质，还具有生物相容性好、不含Cd、Pd等有毒元素、发光强度高等特点。本发明合成了金纳米团簇，同时利用金属铜钴纳米材料Cu₂O@CuCo₂O₄比表面积大、具有催化性能等特点，将其作为金纳米团簇的载体，从而实现在电极表面大量且稳定地固载金纳米团簇。此外共反应促进剂已经广泛地应用于电化学发光信号放大策略中，它能够与共反应剂发生反应促进发光中间体的生成，从而能够提高发光体的激发态数量，增强发光体的ECL信号。本发明通过来Cu₂O@CuCo₂O₄大量地固载ECL发光体金纳米团簇，以三异丙醇胺作为共反应剂，同时以Cu₂O@CuCo₂O₄为共反应促进剂，构建了信号增强型ECL免疫传感器。

发明内容

本发明的目的之一是合成金纳米团簇，并在其表面包裹蛋氨酸外壳；在合成过程中，通过调节孵育时间以及氯金酸和蛋氨酸的量来获得强而稳定的ECL信号。

本发明的目的之二是合成具有催化性能的大比表面积的Cu₂O@CuCo₂O₄并将其作为量子点的载体，并且其可以作为量子点的共反应促进剂；该铜钴纳米材料能够促进三异丙醇胺的分解产生更多的活性中间体，从而能够提高激发态发光体的数量，增强量子点的ECL强度。