[发明专利]一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂，其特征在于：所述微生物杀虫剂通过将菌种固体活化培养后得到，所述菌种包括:新蚜虫疠霉菌22-28％、鲍曼不动杆菌15-20％、苏云金杆菌12-18％、解淀粉芽孢杆菌13-18％、枯草芽孢杆菌10-15％、沙雷氏菌12-16％。

2.根据权利要求1所述的一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂，其特征在于：所述新蚜虫疠霉菌和鲍曼不动杆菌的有效活菌数均≥1.0×10⁹CFU/ml，所述苏云金杆菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌及沙雷氏菌的有效活菌数均≥1.0×10⁸CFU/ml。

3.根据权利要求2所述的一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂，其特征在于：所述微生物杀虫剂中的总菌密度为(5-10)×10⁸个/L。

4.一种根据权利要求1-3所述的一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将新蚜虫疠霉菌和鲍曼不动杆菌分别接入到液体种子活化培养基进行活化，然后分别以5-8％的接种量接入到扩增培养基进行一级培养，培养得到浓度为(1-4)×10⁸CFU/ml，再分别将一级培养所得菌液以5-8％的接种量接入到另外的扩增培养基进行二次培养培养得到浓度为(5-10)×10⁹CFU/ml；

(2)将苏云金杆菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌及沙雷氏菌分别接入到液体种子活化培养基进行活化，然后分别以1-3％的接种量接入到扩增培养基进行一级培养，培养得到浓度为(2-5)×10⁷CFU/ml，再分别将一级培养所得菌液以1-3％的接种量接入到另外的扩增培养基进行二次培养，培养得到浓度为(1-10)×10⁸CFU/ml；

(3)将步骤(1)及步骤(2)所得的各菌液按照比例混合均匀制成初始微生物混合菌剂，将微生物混合菌剂接入含5％糖蜜的无机盐培养基中，微好氧发酵得到总菌密度为(5-10)×10⁸个/L的微生物杀虫剂中。

5.根据权利要求4所述的一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂的制备方法，其特征在于，所述新蚜虫疠霉菌进行活化时，将新蚜虫疠霉菌菌种接种于牛奶-蛋黄培养基，培养21d，培养温度15-20℃；所述新蚜虫疠霉菌进行一级培养时，以5-8％的接种量接入到培养基成分质量百分比为：1％酵母粉、1％蛋白胨和4％葡萄糖的培养基中，振荡培养3d，转速为80-100r/min，培养温度为20-30℃；所述新蚜虫疠霉菌进行二级培养时，以5-8％的接种量接入到培养基为1％酵母粉、1％蛋白胨和4％葡萄糖的培养基中，振荡培养48h，转速为80-100r/min，培养温度为20-30℃。

6.根据权利要求4所述的一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂的制备方法，其特征在于，所述鲍曼不动杆菌进行活化时，将鲍曼不动杆菌菌种接种于LB培养基中，培养16d，培养温度15-20℃；所述鲍曼不动杆菌进行一级培养时，以5-8％的接种量接入到LB培养基中，振荡培养48h，转速为80-100r/min，培养温度为20-30℃；所述鲍曼不动杆菌进行二级培养时，以5-8％的接种量接入到LB培养基中，振荡培养24h，转速为80-100r/min，培养温度为20-30℃。

7.根据权利要求4所述的一种用于防治蚜虫的微生物杀虫剂的制备方法，其特征在于，所述苏云金杆菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌及沙雷氏菌进行活化时，将苏云金杆菌菌种、解淀粉芽孢杆菌菌种、枯草芽孢杆菌菌种及沙雷氏菌菌种分别接种于培养基成分质量百分比为：1％蛋白胨、1％氯化钠、0.5％酵母膏、1％氢氧化钠中，培养10-14h,培养温度30-40℃；所述苏云金杆菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌进行一级培养时，分别以1-3％的接种量接入到成分质量百分比为：1％蜜糖、1％氯化钠、0.5％酵母膏中，振荡培养12-6h，转速为50-80r/min，培养温度为30-40℃；所述苏云金杆菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌进行二级培养时，分别以1-3％的接种量接入到成分质量百分比为：1％蜜糖、1％氯化钠、0.5％酵母膏中，振荡培养8-12h，转速为150-200r/min，培养温度为30-40℃。