[发明专利]一种SARS-CoV-2抗原抗体联合检测的试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及免疫分析医学领域，具体涉及一种SARS‑CoV‑2抗原抗体联合检测的试剂盒及其制备方法。所述试剂盒包括包被有SARS‑CoV‑2病毒的N抗体和SARS‑COV‑2病毒的S抗原的反应板、样品稀释液、酶标记物、显色底物液、洗涤液等。本发明的试剂盒采用双抗原夹心法测总抗体，比捕获法、间接法具有更好的特异性，最大程度的避免假阳性。实现缩短窗口期、提高检出率的目的，且具有检测结果更加准确、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性优异、可测定线性范围宽、操作简单、结果容易判定等优点。

技术领域

本发明涉及免疫分析医学领域，具体涉及一种SARS-CoV-2抗原抗体联合检测的试剂盒及其制备方法。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2，2019-nCOV)的正式分类名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。

新型冠状病毒基因组依次编码刺突蛋白(Spike protein，简称S蛋白)、包膜蛋白(Envelope protein，简称E蛋白)、膜蛋白(Membrane protein，简称M蛋白)和核衣壳蛋白(Nucleocapsid，称N蛋白)。S蛋白是冠状病毒最重要的表面蛋白，与病毒的传染能力及发病机制等密切相关。N蛋白是SARS-CoV-2的重要结构蛋白，在病毒的包装、复制和蛋白质翻译等过程中起关键作用。

目前新冠病毒检测方法主要有核酸检测和抗体检测。抗体检测操作简单方便、快速、对设备和人员要求低，适用于大量疑似病例和无症状感染者检测，最快15分钟内出结果，但是由于平台所限，其灵敏度相对较低，变异大，检测窗口期较长，不能满足对发热早期患者筛查的需要。

夹心法，是将含有已知纯化的抗原、抗体吸附在固相载体上，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与示踪物结合，形成示踪物标记的抗原、抗体。这种标记的抗原抗体既保留其免疫活性，又保留示踪物的活性。测定时，把待测样本和标记抗原、抗体按一定步骤与固相载体表面的抗原、抗体反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的示踪物的量与样本中待检物质的量程正相关。加入酶所作用的底物后，底物被示踪物催化，根据颜色反应的深浅或者光量值的大小，对待检样品定性或定量分析。示踪物特别是酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的灵敏度。

对SARS-CoV-2的抗原抗体夹心法检测主要致力于如何缩短窗口期、提高检出率的目的。提供结果更加准确、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性优异、可测定线性范围宽、操作简单的SARS-CoV-2抗体检测方法。

发明内容

本发明为解决现有技术中的上述问题提出的一种具有缩短检测窗口期、灵敏度高、特异性好、重复性好、取样简便、操作简单、结果容易判定等优势的试剂盒及其制备方法。

本发明的目的在于提供一种SARS-CoV-2抗原抗体联合检测的试剂盒及其制备方法。

根据本发明的技术方案的原理为，采用双抗体夹心法和双抗原夹心法原理同时检测人血清、血浆、咽喉部分泌物中的SARS-CoV-2核衣壳蛋白抗原(以下简称“N蛋白抗原”)和SARS-CoV-2刺突蛋白抗体(以下简称“S蛋白抗体”)。预先采用SARS-CoV-2病毒的N蛋白抗体和SARS-CoV-2病毒的S蛋白抗原同时包被固相载体，加入样本后，若样本中含有SARS-CoV-2病毒的N蛋白抗原和/或SARS-CoV-2病毒的S蛋白抗体，则与固相载体结合，再与加入的示踪物标记的SARS-CoV-2病毒的N蛋白抗体和S蛋白抗原结合，形成固相抗体-抗原-示踪物标记抗体、固相抗原-抗体-示踪物标记抗原的夹心复合物，温育后洗涤除去未结合的样本和示踪物，加入配套底物，读数，根据临界值判断样本中是否含有SARS-CoV-2(2019-nCOV)病毒的N蛋白抗原和/或S蛋白抗体。