[发明专利]一种从植物叶片中同步提取植物多酚和植物蛋白并制备植物蛋白水解肽的方法

说明书

本发明公开了一种从植物叶片中同步提取植物多酚和植物蛋白并制备植物蛋白水解肽的方法，包括以下步骤：(1)选取植物叶片粉，加入TCA/丙酮溶液，震荡后静置过夜；(2)将溶液离心，收集沉淀和上清液；(3)上清液先经过浓缩回收丙酮，利用大孔树脂吸附，先用水洗，再采用洗脱液洗脱，所得目标物经浓缩，即为植物多酚；(4)向沉淀中加入预冷丙酮提取，洗涤，收集沉淀，晾干，得植物叶片蛋白粗提物；(5)将粗提物溶于水中，加入酶进行酶解；(6)调节酶解产物的pH值，离心，收集上清液，即得植物蛋白肽。该方法能同时获取植物多酚、植物蛋白以及植物蛋白水解肽，且该方法原料来源广，操作工艺简单，能耗少，可大规模生产。

技术领域

本发明属于植物提取技术领域，具体涉及一种从植物叶片中同步提取植物多酚和植物蛋白并制备植物蛋白水解肽的方法。

背景技术

植物多酚是多羟基酚类化合物的总称，广泛存在于植物中，有助于植物防御病原、害虫等危害。研究表明植物多酚还具有抗肿瘤、抗氧化、抗动脉粥样硬化、防止冠心病与中风等心脑血管疾病以及抗菌等多种生理功能。传统多酚类化合物的提取分离多选用有机溶剂提取法，该方法不需要特殊的仪器，应用较为普遍，但往往存在着产品安全性低、提取效率低、纯度不高等缺点。近年来，一些以先进仪器为基础的新型提取方法逐渐被人们关注，然而单一的提取方法仍旧存在一些问题，如微波提取法通过微波辐射导致植物细胞内的极性物质吸收微波能，产生大量热，促进细胞多酚类物质的溶解与释放，但是多酚的热稳定性较差，会造成酚类物质的损失；生物酶解法和膜分离技术等方法提取效率高，但是耗时长，价格高。因此实现传统多酚提取工艺的转型升级，实现酚类物质廉价高效地提取尤为重要。

植物叶蛋白是自然界中最丰富且可再生的蛋白资源，营养丰富，必须氨基酸分布均衡，生物效价高，可以用作动物饲料或者食品添加剂。目前叶蛋白的提取方法比较多，但提取过程均会存在一些问题，如常见的加热提取法，能耗较高，热处理过程中易引发蛋白质的变性；常见的化学提取法(如酸/碱提取法)容易诱发环境污染；传统发酵法则往往耗时较长，产品得率有限等问题。此外，由于蛋白是大分子，直接用作动物饲料往往吸收利用率较低，对其进行酶解后转化为小分子肽，能有效提高植物蛋白的生物利用率，提高产品的价值。研究表明，植物蛋白肽，是从植物或农作物中提取的一种水溶性蛋白，是国内外公认的氧自由基的专一清除剂，在护肤品和保健品等领域有广泛应用。因此，对传统叶蛋白的提取工艺进行升级改造，制备植物蛋白肽势必会为植物蛋白资源在食品、饲料及医疗等行业的应用赢得更广阔的市场。

目前，同时分离提取植物多酚和植物蛋白的工艺报道较少，直接分离叶蛋白制备多肽的报道更是有限。中国专利申请号201010195957.8和中国专利申请号201910059469.5，虽然分别提供了一种提取叶蛋白和叶多酚的工艺方法，但是这两种工艺过程相对比较复杂，耗时耗能，不适合大规模生产；中国专利申请号201810426060.8公布了一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液，该方法也是采用了TCA/丙酮沉淀法提取蛋白，但是该方法旨在提取分离植物蛋白，而非制备蛋白肽，且未涉及植物中多种有效成分的同步分离。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从植物叶片中同步提取植物多酚和植物蛋白并制备植物蛋白水解肽的方法，该方法能同时获取植物多酚、植物蛋白以及植物蛋白水解肽，且该方法原料来源广，操作工艺简单，能耗少，可大规模生产。

本发明的上述目的可以通过以下技术方案来实现：一种从植物叶片中同步提取植物多酚和植物蛋白并制备植物蛋白水解肽的方法，包括以下步骤：

(1)选取植物叶片粉，加入预冷的1,1,1-三氯乙烷(TCA)/丙酮溶液，充分震荡后静置过夜；

(2)将静置过夜后溶液离心，分别收集沉淀和上清液；

(3)将步骤(2)的上清液先经过真空减压浓缩回收丙酮，所得浓缩液利用大孔树脂吸附，先用水洗去TCA，再采用洗脱液洗脱分离植物多酚，所得目标物经真空减压浓缩，即为植物多酚；