[发明专利]一种新冠病毒RBD特异性单克隆抗体的线性抗原表位和应用

说明书

本发明属于免疫技术领域，具体公开了一种新冠病毒RBD特异性单克隆抗体的线性抗原表位，具有如下氨基酸序列：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和/或SEQ ID NO:3。本发明还公开了上述新冠病毒RBD特异性单克隆抗体的线性抗原表位的应用。本发明得到的一种新冠病毒RBD特异性单克隆抗体的线性抗原表位对新冠肺炎疫苗研发以及小分子药物的研发、诊断、预防和治疗具有重要意义。

技术领域

本发明属于免疫技术领域，尤其涉及一种新冠病毒RBD特异性单克隆抗体的线性抗原表位和应用。

背景技术

SARS-CoV-2属于套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)，是目前人类已知的RNA病毒中基因组最大的病毒，其长度为27至32kb，并具有至少4个主要结构蛋白，包括刺突蛋白(S蛋白)、膜蛋白(M蛋白)、包膜蛋白(E蛋白)和核衣壳蛋白(N蛋白)，病毒进入细胞取决于S蛋白和S蛋白的受体结合域(RBD)，S蛋白有S1和S2两个亚基，受体结合位点(RBD)位于S1亚基上，其主要功能是识别宿主细胞表面受体，介导与宿主细胞的融合；N蛋白是一种碱性磷蛋白，其中央区与病毒基因组RNA结合，形成卷曲的核衣壳螺旋，是包裏病毒遗传物质的核心结构，是在感染细胞中是表达量最高的病毒蛋白之一。

新冠病毒抗原表位的研究对于新冠病毒的预防、检测、诊断和治疗均具有重要意义。申请公开号为CN111440229A的中国发明专利申请公开了一种新冠病毒T细胞表位，该专利利用IEDB资源Class I Immunogenicity工具预测了新冠病毒N蛋白的T细胞表位，分析了600个具有免疫原性、181个不具有免疫原性的9mer肽，但是目前还未有文献报道B细胞识别的线性抗原表位。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够被B细胞识别的一种新冠病毒RBD特异性单克隆抗体的线性抗原表位和应用。

为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种新冠病毒RBD特异性单克隆抗体的线性抗原表位，具有如下氨基酸序列：SEQID NO:1、SEQ ID NO:2和/或SEQ ID NO:3。

本发明还提供了一种编码线性抗原表位的核酸。

本发明还提供了一种包括核酸的重组载体。

本发明还提供了一种上述核酸或导入了上述重组载体的宿主细胞。

本发明还提供了一种疫苗，包括以下任一项：(1)以本发明所提供的线性抗原表位作为有效成分；(2)以本发明所提供的核酸作为有效成分；(3)以本发明所提供的重组载体作为有效成分。

本发明还提供了一种检测试纸或者检测试剂，包括本发明所提供的线性抗原表位。

本发明的原理和有益效果在于：

本发明获得的线性表位对于新冠病毒检测、诊断、疫苗研发和治疗药物的研发均具有广泛的应用前景，例如，使用本发明所提供的线性表位检测患者体内的抗体滴度，检测接种新冠疫苗后的体液免疫反应状态，可以用于小分子药物开发、疫苗研发等。

附图说明

图1为实验一中新冠病毒RBD特异性抗体与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3抗原结合的ELISA结果图；

图2为实验二中新冠病毒线性表位SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3与患者血浆结合，而与健康人不结合的实验结果图；

图3为实验三中新冠病毒线性表位SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3与RBD受体ACE2结合的实验结果图；

图4为采用流式细胞仪分析RBD特异性记忆B细胞的细胞分选图