[发明专利]一种浒苔中活性成分的高效分离分析方法

权利要求书

1.一种浒苔中活性成分的高效分离分析方法，其特征是，对条浒苔的醇提物进行乙酸乙酯萃取获得条浒苔提取物，对条浒苔提取物高速逆流色谱进行分离纯化获得若干组分，对每个组分进行液质联用检测；

高速逆流色谱采用的两相体系包括两种，第一种两相体系为叔丁基甲醚、乙腈、水按体积比为3.5～4.5:1:4.5～5.5，第二种两相体系为叔丁基甲醚、正丁醇、乙腈、水按体积比为2.5～3.5:0.9～1.1:1:4.5～5.5，使用时，第一种两相体系的下相作为固定相，第一种两相体系的上相和第二种两相体系的上相均作为流动相；

以第一种两相体系的上相作为流动相进行色谱分离，分离出第5种组分后，再以第二种两相体系的上相作为流动相继续进行色谱分离；

高速逆流色谱仪柱体积为250～350mL，上样量150～250mg，转速700～900转/min，流速1.5～2.5mL/min，检测波长254±2nm；

液质联用的色谱条件为：色谱柱为C18柱，紫外检测波长280±2nm，流速：0.5～1.5mL/min，进样量：5～15μL，流动相A相为乙腈，流动相B相为0.2％甲酸溶液；

液质联用的色谱的梯度洗脱程序为：0min，10％A；0–5min，10-25％A；5–15min，25-25％A；15–40min，25-45％A；40–45min，45-45％A；45–46min，45-10％A；46–51min，10-10％A。

2.如权利要求1所述的浒苔中活性成分的高效分离分析方法，其特征是，条浒苔的醇提物采用体积分数为55～65％的乙醇进行提取。

3.如权利要求2所述的浒苔中活性成分的高效分离分析方法，其特征是，条浒苔的醇提物的提取过程为，将条浒苔粉末用55～65％的乙醇回流提取2～4次，每次2～4天，提取后过滤，再浓缩至无醇味获得条浒苔的醇提物。

4.如权利要求1所述的浒苔中活性成分的高效分离分析方法，其特征是，将两相体系的原料混合，静置分层后，上层为两相体系的上相，下层为两相体系的下相。

5.如权利要求1所述的浒苔中活性成分的高效分离分析方法，其特征是，高速逆流色谱进行分离纯化时，先以第一种两相体系的下相作为固定相，以第一种两相体系的上相作为流动相进行色谱分离，分离结束后，再以第二种两相体系的上相作为流动相继续进行色谱分离。

6.如权利要求1所述的浒苔中活性成分的高效分离分析方法，其特征是，C18柱的填料粒径为5±1μm，柱内径为4.6±0.1mm，柱长为245～255mm。