[发明专利]一种用于KIM-1蛋白的无酶电化学免疫检测系统及其制备和使用方法

说明书

本方案公开了蛋白的检测技术领域中的一种用于KIM‑1蛋白的无酶电化学免疫检测系统，包括：上层复合物：所述上层复合物为PdPtBP介孔合金纳米颗粒与Ti₃C₂T_X MXene分散液结合制成的PdPtBP介孔纳米颗粒/迈科烯纳米复合物，在所述PdPtBP介孔纳米颗粒/迈科烯纳米复合物上结合有标记抗体；下层复合物：所述下层复合物为修饰后的电极，所述修饰后的电极为利用CuCl₂纳米线和金纳米颗粒修饰的电极，在所述修饰后的电极上结合有捕获抗体；检测体系：所述检测体系为含有H₂O₂的PBS溶液。本方案实现了蛋白的无酶检测，解决了现有技术中检测成本高，操作复杂，灵敏度低，特异性差等问题。

技术领域

本发明属于蛋白的检测技术领域，特别涉及一种用于KIM-1蛋白的无酶电化学免疫检测系统及其制备和使用方法。

背景技术

急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)是一种治疗成本高、死亡率高的临床住院疾病。目前，AKI的标准诊断工具是监测尿量和血清肌酐(sCr)。然而，两者都是肾功能的标志物，而不是肾脏损伤的标志物。此外，因为尿量和sCr容易受到肌肉质量、年龄、性别和饮食等因素的影响，从而限制了尿量和sCr在诊断AKI方面的应用。最近的证据表明，尿肾损伤分子-1(Kidney injury molecule-1,KIM-1)蛋白是AKI的一个潜在标志物，可快速、无创地反映肾脏损伤和恢复过程。因此，开发可靠、灵敏度高的KIM-1蛋白检测方法对临床诊断和治疗具有重要意义。酶联免疫吸附试验(ELISA)是用于检测KIM-1蛋白的主要方法，还有一些其他基于小众技术平台的检测方法，包括表面等离子体共振成像(SPRi)和Luminex。然而，这些技术在实践中仍面临许多挑战，例如需要复杂、昂贵的仪器，检测灵敏度低，使用昂贵的生物酶等。传统的电化学免疫检测系统大多需要生物酶作为催化剂，其存在不稳定、易失活的缺点，很难在保证生物酶活性的同时实现信号级联放大。

因此，发展一种灵敏度高、特异性好、重复性好、检测成本低的无酶电化学免疫检测方法，可以有效扩大KIM-1在临床检验诊断中的应用范围，对AKI的早期诊断和治疗具有较大意义。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种用于KIM-1蛋白的无酶电化学免疫检测系统，用于解决现有技术中检测成本高，操作复杂，灵敏度低，特异性差等问题。

本方案中的一种用于KIM-1蛋白的无酶电化学免疫检测系统，包括：

上层复合物：所述上层复合物为PdPtBP介孔合金纳米颗粒与Ti₃C₂T_X MXene分散液结合制成的PdPtBP介孔纳米颗粒/迈科烯纳米复合物，所述PdPtBP介孔纳米颗粒/迈科烯纳米复合物上结合有标记抗体；

下层复合物：所述下层复合物为修饰后的电极，所述修饰后的电极为利用CuCl₂纳米线和金纳米颗粒修饰的电极，所述修饰后的电极上结合有捕获抗体；

检测体系：所述检测体系为含有H₂O₂的PBS溶液。

进一步，所述含有H₂O₂的PBS溶液中H₂O₂的浓度为4mmol/L。

制备一种用于KIM-1蛋白的无酶电化学免疫检测系统的方法，包括以下步骤：

步骤一、上层复合物的制备：