[发明专利]一株芽孢杆菌PL-2及其在水产养殖中的应用

说明书

本发明公开了一株芽孢杆菌PL‑2及其在水产养殖中的应用，其中，该芽孢杆菌PL‑2保藏编号为CCTCC NO：M 2020049，是从采自于威海市南海新区某养殖池的底泥样品中分离、纯化得到的，对氨氮、硫化氢、有机磷有良好的降解作用，发酵产物对溶藻弧菌和嗜水气单胞菌有良好的抑制作用，可以微生物菌剂的方式投施至养殖水域，是一种生物防治手段，具有与化学防治相比环保无污染、与物理防治相比防治成本更低、效益更高的特点。

技术领域

本发明涉及一株菌株及其应用，具体涉及一株芽孢杆菌PL-2及其在水产养殖中的应用，属于微生物技术领域。

背景技术

水体是水产动物生存生长所必须依赖的环境，水体水质的好坏是水产养殖特别是集约化养殖成败的关键。目前的水产养殖模式还大都是以多品种、高密度、大量施肥投饵从而获得高产量的传统养殖模式，人类的活动和养殖对象自身的分泌物和排泄物、饵料过剩、药物残留等因素极易导致养殖水体污染、水质因子平衡失调，使得水中氨氮、磷、亚硝酸盐、硫化氢等物质的含量迅速升高，进而引起水产养殖动物发病甚至大批量死亡。

当前以抗生素、激素、防腐剂为主的饲料药物添加剂给水产养殖业生产带来了很大的效益，含有这些饲料药物添加剂的饲料能够达到控制部分疾病发生、促进养殖动物生长的目的，但由此带来的药物残留、二次污染、水产品质量安全等问题愈发严重。

随着生物技术的迅速发展，生物防治措施日益受到人们的关注。生物防治是指：微生物通过调节水环境微生态平衡、拮抗致病微生物、降解养殖过程中的有机废物和无机废物等，来实现提高水生生物的免疫力和抗病力、促进水生生物生长以及净化水质的效果。

发明内容

本发明的目的在于：筛选一株有益微生物，并以微生物菌剂的方式投施至养殖水域，以实现改善水产养殖水体的水质、提升水产品的产量和品质，并确保环保无污染。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一株芽孢杆菌PL-2，其特征在于，该芽孢杆菌PL-2保藏编号为CCTCC NO：M2020049，保藏日期为2020 年03月02日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉。该芽孢杆菌PL-2是从采自于威海市南海新区某养殖池的底泥样品中分离、纯化得到的，对氨氮、硫化氢、有机磷有良好的降解作用，发酵产物对溶藻弧菌和嗜水气单胞菌有良好的抑制作用。

前述的芽孢杆菌PL-2在水产养殖方面的应用，其特征在于，制成微生物菌剂进行使用，该微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：

步骤1：将芽孢杆菌PL-2划线接种在牛肉膏蛋白胨固体培养基上，培养获得单菌落；

步骤2：从牛肉膏蛋白胨固体培养基上挑取单菌落接种至LB液体培养基中，培养获得种子液；

步骤3：将所得种子液接种至发酵培养基中，培养获得发酵液，其中，发酵培养基的配方为：NH₄Cl 1g、CH₃COONa 3g、MgCl₂ 0.2g、CaCl₂ 0.2g、KH₂PO₄ 0.6g、NaCl 1g、酵母膏 2g、葡萄糖 2g、水1000 ml；

步骤4：将所得发酵液离心，弃上清得湿菌液；

步骤5：将沸石粉、牡蛎粉和硅藻土中的任意一种或任意几种按重量比1-4:2添加至所得湿菌液中，搅拌混匀，低温干燥，分装即得微生物菌剂。

前述的应用，其特征在于，在步骤1中，培养条件为：30℃恒温倒置培养24h。

前述的应用，其特征在于，在步骤2中，培养条件为：35℃、150rpm活化培养10h。

前述的应用，其特征在于，在步骤5中，沸石粉、牡蛎粉和硅藻土在使用前均先过250-300目筛。