[发明专利]高密度脂蛋白3胆固醇的定量方法、测定试剂及制备方法

说明书

本发明公开了一种高密度脂蛋白3胆固醇的定量方法，包括以下步骤：(1)将试样与含有第一表面活性剂、脂蛋白胆固醇遮蔽剂和二价金属离子的第一试剂混合反应，得第一反应液，以及遮蔽全部脂蛋白胆固醇；(2)将第一反应液与含有第二表面活性剂的第二试剂混合反应，得第二反应液；(3)读取第二反应液在色原化合物相应波长处的吸光度值，计算高密度脂蛋白3胆固醇的含量。利用表面活性剂、脂蛋白胆固醇遮蔽剂和二价金属离子清除高密度脂蛋白3胆固醇以外的脂蛋白胆固醇和遮蔽全部的脂蛋白胆固醇，能大大提高测量精度。本发明还公开了一种采用上述方法的测定试剂以及该测定试剂的制备方法。

技术领域

本发明涉及生化检测技术领域，特别是涉及一种高密度脂蛋白3胆固醇的测定试剂及制备方法。

背景技术

高密度脂蛋白(HDL)是血液中脂蛋白的组成成分之一，一般将HDL亚组分中颗粒较小密度较大的HDL称为高密度脂蛋白3(HDL3)，HDL3中的胆固醇(HDL3-C)是检测心血管疾病的重要指标。

目前在临床检测应用中，测定HDL3的方法有电泳法、超速离心法和分级沉淀法等，均具有较高的精度，企业或医院采用对应的方法需采购对应的仪器设备，并配备相关的技术人员。

现有的检测方法需采用昂贵的仪器设备和专门的技术人员，操作步骤繁琐，一般需要长达十几个小时，检测时间长，难以应用于快速临床医学检测。

发明内容

本发明的一个目的在于提出一种能够快速检测的高密度脂蛋白3胆固醇的测定试剂。

一种高密度脂蛋白3胆固醇的定量方法，用于非疾病的诊断和治疗目的，包括以下步骤：

(1)将试样与含有第一表面活性剂、脂蛋白胆固醇遮蔽剂和二价金属离子的第一试剂混合反应，得第一反应液，所述第一试剂用于清除所述试样中高密度脂蛋白3胆固醇以外的脂蛋白胆固醇，以及遮蔽全部脂蛋白胆固醇；

(2)将第一反应液与含有第二表面活性剂的第二试剂混合反应，得第二反应液；

(3)读取第二反应液在546nm和660nm波长处的吸光度值，计算高密度脂蛋白3胆固醇的含量。

本发明的有益效果在于：利用表面活性剂、脂蛋白胆固醇遮蔽剂和二价金属离子能清除高密度脂蛋白3胆固醇以外的脂蛋白胆固醇和遮蔽全部的脂蛋白胆固醇，能大大提高测量精度。

本发明的另一个目的在于提出一种高密度脂蛋白3胆固醇的测定试剂，包括以下组分：

第一试剂，包括色原化合物、二价金属离子、第一表面活性剂、遮蔽剂、胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化氢酶、第一缓冲液、第一防腐剂和第一稳定剂；

第二试剂，包括第二缓冲液、过氧化物酶、4-氨基安替比林、第二稳定剂、第二防腐剂和第二表面活性剂。

在本发明中，将胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和过氧化氢酶组合使用，再配合过氧化物酶和4-氨基安替比林能实现快速检测，同时能确保检测的精度。

另外，根据本发明提供的高密度脂蛋白3胆固醇的测定试剂，还可以具有如下附加的技术特征：

进一步地，所述第一缓冲液和所述第二缓冲液均为MOPS缓冲液或MOPSO缓冲液。

进一步地，所述第一稳定剂为抗坏血酸氧化酶、牛血清白蛋白、氯化钠、EDTA中的一种或多种，所述第一防腐剂为Proclin-300，所述第二防腐剂为叠氮钠。