[发明专利]用于在植物中增强种子特异性基因表达而促进增强的多不饱和脂肪酸合成的调节性核酸分子在审
| 申请号: | 202010818571.1 | 申请日: | 2010-08-27 |
| 公开(公告)号: | CN112011566A | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
| 发明(设计)人: | T·森杰;J·鲍尔;J·M·库恩 | 申请(专利权)人: | 巴斯夫植物科学有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/10;A01H6/20 |
| 代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 史文静;黄革生 |
| 地址: | 德国莱茵河*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 植物 增强 种子 特异性 基因 表达 促进 不饱和 脂肪酸 合成 调节 核酸 分子 | ||
1.一种多核苷酸,其包含种子特异性启动子和与所述启动子功能性连接的异源的特异性表达增强元件(NEENA),并且进一步包括在所述启动子的控制下待表达的核酸序列,其中NEENA选自:
i)SEQ ID NO:8的核酸序列中所示的核酸分子,
ii)与i)的核酸序列具有至少95%序列同一性的核酸分子,其中与在缺少NEENA的启动子的控制下待表达的核酸相比,所述核酸分子增强在所述启动子控制下待表达的核酸序列的表达,以及
iii)i)或ii)的核酸序列的至少100个连续碱基的核酸分子,与在缺少NEENA的启动子的控制下待表达的核酸相比,所述核酸分子增强在所述启动子控制下待表达的核酸序列的表达;
iv)使用以下引物,从作为模板的植物DNA中通过PCR能够获得的核酸分子:SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77。
2.权利要求1所述的多核苷酸,其中在所述启动子控制下的待表达的核酸序列编码具有去饱和酶或延伸酶活性的多肽。
3.权利要求2所述的多核苷酸,其还包含编码具有
i)β-酮酰还原酶活性;
ii)脱水酶活性;和/或
iii)烯酰辅酶A还原酶活性,的多肽的核酸序列,其中i)至iii)中任一项中定义的核酸序列相对于具有去饱和酶或延伸酶活性的所述多肽是异源的。
4.权利要求2或3所述的多核苷酸,其还包含编码具有酰基转移酶活性的多肽的至少一个核酸序列,其中所述核酸序列相对于具有去饱和酶、延伸酶、β-酮酰还原酶、脱水酶或烯酰辅酶A还原酶活性的所述多肽是异源的。
5.权利要求2至4中任一项所述的多核苷酸,其还包含与编码具有去饱和酶或延伸酶活性的多肽的所述核酸序列有效连接的终止子。
6.表达构建体,其包含权利要求1至5中任一项的多核苷酸,其中启动子在植物的部分或植物细胞中是有功能的,且其中启动子功能性连接在所述植物的部分或植物细胞中待表达的目的核苷酸序列。
7.包含权利要求1至5任一项所述的多核苷酸或权利要求6的表达构建体的载体。
8.宿主细胞,其包含权利要求1至5任一项所述的多核苷酸或权利要求6所述的表达构建体或权利要求7所述的载体。
9.权利要求8所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞是植物细胞。
10.种子特异地增强基因表达的方法,其包括以下步骤:
i)用如权利要求1至5中任一项定义的多核苷酸转化植物细胞,和
ii)表达待表达的核酸序列。
11.选自以下的核酸分子的用途:
i)SEQ ID NO:8的核酸序列中所示的核酸分子,
ii)与i)的核酸序列具有至少95%序列同一性的核酸分子,其中与在缺少NEENA的启动子的控制下待表达的核酸相比,所述核酸分子增强在所述启动子控制下待表达的核酸序列的表达,以及
iii)i)或ii)的核酸序列的至少100个连续碱基的核酸分子,与在缺少NEENA的启动子的控制下待表达的核酸相比,所述核酸分子增强在所述启动子控制下待表达的核酸序列的表达;
iv)使用以下引物,从作为模板的植物DNA中通过PCR能够获得的核酸分子:SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77;
用于
-增强待表达的核酸序列的表达,或
-增强具有脱水酶或延长酶活性的多肽的表达。
12.权利要求8或9中定义的宿主细胞的用途,用于
-生产多不饱和脂肪酸,或者
-生产食物、动物饲料、药物或精细化学品。
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