[发明专利]维持角膜活性的保存液

说明书

本发明的维持角膜活性的保存液，包括角膜基础保存液和一氧化氮纳米泡，一氧化氮纳米泡均匀地分散于角膜基础保存液中。角膜基础保存液包括聚谷氨酸10.0g/L、泊洛沙姆10g/L、胆红素50mg/L、表皮细胞生长因子5mg/L。一氧化氮纳米泡是由蛋黄磷脂为泡膜材料包裹一氧化氮气体形成的泡囊组成，在角膜基础保存液中的浓度为1×10⁶～5×10⁶个/mL。本发明的保存液用于角膜的体外保存。

技术领域

本发明涉及一种维持角膜活性的保存液，特别涉及一种维持角膜活性的体外保存溶液。

背景技术

近年来，角膜疾病已成为我国第二大致盲性眼病。但作为一种可治性盲，通过进行板层或穿透性角膜移植手术即可使患者重获光明。由于我国国情所限，可供移植的角膜材料相对匮乏且分配不均，临床上使用的角膜材料相当一部分需要经过不同时间的保存。

角膜内皮为角膜内侧的单层细胞，可不断排出基质中水分而保持角膜透明。角膜内皮作为眼表的重要屏障，其完整性对角膜移植，尤其是角膜缘组织移植的成功与否有着重要影响，长期角膜内皮缺损会引起创口迁延不愈，角膜基质浑浊、瘢痕形成，新生血管形成，最终导致移植失败。因此，角膜内皮细胞数量和活力对于角膜移植的术后效果具有重要影响。

多项研究表明，角膜内皮活细胞数量会随着保存时间延长而逐渐减少，从而无法用于角膜移植，因此，为了进一步的适应临床应用的需要，开发一种即能延长角膜内皮细胞活性的保存时间又能够有效维持内皮细胞活性的保存液已经成为制约角膜移植治疗发展的瓶颈。

发明内容

本发明的目的在于克服制约角膜治疗技术发展的瓶颈，提供一种提高角膜内皮细胞活性和延长保存时间的保存溶液，保证角膜的生物活性，同时满足临床角膜移植治疗的安全、有效、便捷、经济的要求。

本发明申请人发现，适宜浓度的一氧化氮气体对于角膜的物活性具有显著作用，但这种作用受到多方面因素的影响，尤其是微环境，对于一氧化氮气体发挥角膜保护作用影响显著。但一氧化氮(NO)微溶于水，无法直接应用于角膜保存液中。已有报道的用于补充体内一氧化氮的方法多是应用一氧化氮供体化合物。一氧化氮供体化合物分为两类：非酶生型和酶生型。非酶生型一氧化氮供体化合物大部分来自硝基化合物，包括硝普盐、有机或无机亚硝酸盐和硝酸盐、亚硝胺、氮芥、联氨等，剂量小且毒副作用大。而酶生型一氧化氮供体化合物(如精氨酸)需要通过体内生物酶等作用分解产生出一氧化氮分子。以上这些一氧化氮供体化合物都无法直接应用于角膜保存液中。此外，表皮细胞生长因子对于角膜具有一定保护作用，但单独应用表皮细胞生长因子对于表皮细胞有损伤的角膜，保护效果并不理想。

本发明申请人通过大量实验，制备出维持角膜活性的保存液，该保存液包括角膜基础保存液和一氧化氮纳米泡，一氧化氮纳米泡均匀地分散于角膜基础保存液中。

上述的角膜基础保存液包括：聚谷氨酸10.0g/L、泊洛沙姆10g/L、胆红素50mg/L、表皮细胞生长因子5mg/L。

上述的角膜基础保存液中进一步加入：糖、电解质盐、抗凝剂、氨基酸、pH值缓冲剂、抗菌剂和抗氧化剂。

上述的一氧化氮纳米泡是由蛋黄磷脂为泡膜材料包裹一氧化氮气体形成的泡囊组成。

上述的一氧化氮纳米泡的粒径范围为500～900nm。

上述的一氧化氮纳米泡的优选粒径范围为600～800nm。

上述的一氧化氮纳米泡在角膜基础保存液中的浓度为1×10⁶～5×10⁶个/mL。

上述维持角膜活性的保存液的使用温度为0～37℃。

上述维持角膜活性的保存液的优选使用温度为15～20℃。

上述维持角膜活性的保存液用于角膜的体外保存。