[发明专利]一种猪源罗伊氏乳杆菌的改良培养方法

说明书

本发明公开了一种猪源罗伊氏乳杆菌的改良培养方法，该方法为将猪源罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基进行培养，培养条件为：培养温度37～43℃,转速0～120r/min，无氧且供二氧化碳，培养36～48h。本发明对猪源罗伊氏杆菌的培养条件进行了优化改良；本发明对培养时间、温度、氧气含量、转速、接种量多个环境条件进行优化改良，制定的培养方法可在体外对猪源罗伊氏杆菌进行高效培养。

技术领域

本发明涉及到微生物培养技术，具体描述了一种猪源罗伊氏乳杆菌的改良培养方法。

背景技术

肠道微生物特指在宿主肠道内生存活动的微生物群落，其具有许多宿主本身所不具有的生物功能基因。肠道微生物在宿主营养物质消化吸收、机体免疫、疾病发生等过程中具有重要作用。近年来随着微生物研究的发展，大量益生菌包括乳酸菌、双歧杆菌和酵母菌等在动物体内被发现，并在疾病治疗、营养改良、食品添加等领域广泛应用。益生菌的体外扩大培养对是其在生产应用的基础，因此，探究益生菌的体外培养方法对于益生菌的开发应用具有重要意义。

罗伊氏乳杆菌是存在于动物消化道中的一种革兰氏阳性菌，具有广谱抗菌、提高机体免疫力的特性，其在生物抑菌剂、抗感染治疗剂、生物交联剂等方面有着良好的应用前景。猪源罗伊氏乳杆菌具有良好的益生功能，可促进仔猪生长和改善肠道健康，并具有较好的免疫调节功能。猪源罗伊氏乳杆菌在养猪生产中有着良好的应用前景，但目前缺乏对其体外培养条件的系统研究。本发明提供了猪源罗伊氏乳杆菌的一种改良培养方法，可为该菌种规模化培养及在养猪生产中的科学应用提供技术支撑。

发明内容

本发明的目的在于提供一种猪源罗伊氏乳杆菌的改良培养方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种猪源罗伊氏乳杆菌的改良培养方法，该方法为将猪源罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基进行培养，培养条件为：培养温度37～43℃,转速0～120r/min，无氧且供二氧化碳，培养36～48h。

作为一种优选技术方案，将猪源罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基时猪源罗伊氏乳杆菌的接种量为培养基体积的3％～6％。优选的，猪源罗伊氏乳杆菌的接种量为培养基体积的3％。

进一步优选的，所述的培养条件为：培养温度40～42℃,转速0～60r/min，无氧且供二氧化碳，培养36～45h。更进一步优选的，所述的培养条件为：培养温度41℃,转速60r/min，无氧且供二氧化碳(培养箱中二氧化碳含量为15％～25％)，培养36h。

上述的方法在培养猪源罗伊氏乳杆菌中的应用。

本发明所述的猪源罗伊氏乳杆菌的改良培养方法经过以下步骤筛选得到：

(1)筛选培养时间：将猪源罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基，分别培养12h、24h、36h和48h，其它培养条件相同(温度37℃、接种量5％、转速120r/min、无氧)，之后取各自培养时长下的菌液使用紫外可见分光光度计检测OD600吸光值。

(2)筛选培养温度：将猪源罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基，分别置于35℃、37℃、39℃、41℃和43℃温度下培养，其它培养条件同第一步，36h后使用紫外可见分光光度计检测OD600吸光值。

(3)筛选接种量：分别按照培养基体积的1％、2％、3％、4％、5％和6％接种猪源罗伊氏乳杆菌，其它培养条件同第一步，36h后使用紫外可见分光光度计检测OD600吸光值。

(4)筛选不同气体环境：将猪源罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基，分别置于无氧、微氧和无氧且供二氧化碳条件下培养(培养箱中二氧化碳含量为15％～25％)，其它培养条件同第一步，36h后使用紫外可见分光光度计检测OD600吸光值。