[发明专利]抗肿瘤细胞转移和血管生成的靶向拮抗肽及其应用

说明书

本发明中公开了一种抗肿瘤细胞转移和血管生成的靶向拮抗肽及其应用。该靶向拮抗肽选自如下任一序列：(a)由His‑Ala‑Leu‑Pro‑Met‑Trp‑Ser‑His‑Met‑Pro‑Ala‑Ala组成的肽；(b)在His‑Ala‑Leu‑Pro‑Met‑Trp‑Ser‑His‑Met‑Pro‑Ala‑Ala的N末端和/或C末端增加一个或多个氨基酸残基组成的肽。本发明中的靶向拮抗肽可采用现有多肽合成技术生成，成本低，安全性高，可特异性抑制成纤维细胞生长因子(FGFs)刺激的细胞增殖、迁移和侵袭，以及血管生成，因此，可将其用于治疗FGFs/FGFR3介导的信号通路异常活化的多种恶性肿瘤，适用范围广。

技术领域

本发明属于肽技术领域，特别涉及一种抗肿瘤细胞转移和血管生成的靶向拮抗肽及其应用。

背景技术

成纤维细胞生长因子(FGFs)通过结合和激活成纤维细胞生长因子受体(FGFRs)启动下游多条信号级联通路，在生理条件下参与机体正常生长、分化、新陈代谢和器官形成。然而，FGFs/FGFRs信号失调亦导致机体发生病理性改变，产生恶性肿瘤、软骨发育不良和X连锁低磷佝偻病等疾病。

FGFR3是FGFRs家族的重要成员之一，FGFR3基因改变(突变、易位或扩增)存在于多种肿瘤中，包括膀胱癌、人胶质母细胞瘤、黑色素瘤、结直肠癌和胃癌等。研究表明，FGFR3在膀胱癌肿瘤组织中呈高表达，可促进膀胱癌细胞的生长和转移。FGFR3活化还与肿瘤耐药相关，FGFR3在曲妥珠单抗耐药的胃癌细胞中表达上调，FGFR3/AKT信号轴是介导胃癌细胞对曲妥珠单抗产生耐药的信号通路。此外，FGFR3参与多种肿瘤的血管生成。FGFR3通过上调单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的表达，调控肝癌的血管生成和转移，FGFR3促肝癌细胞转移与其增强血管生成密切相关。在尿路上皮癌中，FGFR3诱导血管生成表型，并显著影响患者预后。FGF2是FGFR3的高亲和力配体，在肿瘤缺氧的微环境中，巨噬细胞释放FGF2，刺激血管内皮细胞增殖，并通过上调血管生成关键分子的表达，促进血管生成。已报道人骨肉瘤细胞中脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)通过上调FGF2和FGFR3的表达，促进FGF2/FGFR3介导的管腔形成，诱导血管生成，且APE1、FGF2和FGFR3的高表达以及微血管密度与骨肉瘤患者的不良预后呈正相关。FGFR3的另一高亲和力配体FGF18，通过结合血管内皮细胞的FGFR3，激活胞内的PI3K/AKT和ERK通路，促进肿瘤微环境血管生成。上述研究表明FGFs/FGFR3参与调控肿瘤细胞的转移和血管生成，可能是潜在的抗肿瘤细胞转移和血管生成的治疗靶点(参见Williams S V,Hurst C D,Knowles M A.Oncogenic FGFR3 gene fusions in bladdercancer.Hum Mol Genet,2013,22(4):795-803；Frattini V,Pagnotta S M,Tala,et al.Ametabolic function of FGFR3-TACC3 gene fusions in cancer.Nature,2018,553(7687):222-227；Kikuchi A,Suzuki T,Nakazawa T,et al.ASP5878,a selective FGFRinhibitor,to treat FGFR3-dependent urothelial cancer with or withoutchemoresistance.Cancer Sci,2017,108(2):236-242；Liao X,Chen J,Liu Y,etal.Knockdown of long noncoding RNA FGFR3-AS1 induces cell proliferationinhibition,apoptosis and motility reduction in bladder cancer.Cancer Biomark,2018,21(2):277-285；Piro G,Carbone C,Cataldo I,et al.An FGFR3 autocrine loopsustains acquired resistance to trastuzumab in gastric cancer patients.ClinCancer Res,2016,22(24):6164-6175；Liu X,Jing X,Cheng X,et al.FGFR3promotesangiogenesis-dependent metastasis of hepatocellular carcinoma viafacilitating MCF-1-mediated vascular formation.Med Oncol,2016,33(5):46；BertzS,AbeéC,Schwarz-Furlan S,et al.Increased angiogenesis and FGFR proteinexpression indicate a favourable prognosis in bladder cancer.Virchows Arch,2014,465(6):687-695；Kuwabara K,Ogawa S,Matsumoto M,et al.Hypoxia-mediatedinduction of acidic/basic fibroblast growth factor and platelet-derivedgrowth factor in mononuclear phagocytes stimulates growth of hypoxicendothelial cells.Proc Natl Acad Sci U S A,1995,92(10):4606-4610；Mignatti P,Rifkin D B.Biology and biochemistry of proteinases in tumor invasion.PhysiolRev,1993,73(1):161-195；Klein S,Giancotti F G,Presta M,et al.Basic fibroblastgrowth factor modulates integrin expression in microvascular endothelialcells.Mol Biol Cell,1993,4(10):973-982；Ren T,Qing Y,Dai N,et al.Apurinic/apyrimidinic endonuclease 1induced upregulation of fibroblast growth factor 2and its receptor 3 induces angiogenesis in human osteosarcoma cells.CancerSci,2014,105(2):186-194；Guo P,Wang Y,Dai C,et al.Ribosomal protein S15apromotes tumor angiogenesis via enhancing Wnt/beta-catenin-induced FGF18expression in hepatocellular carcinoma.Oncogene,2018,37(9):1220-1236.)。