[发明专利]一种基于液晶的检测探针及其制备方法和应用在审
| 申请号: | 202010800753.6 | 申请日: | 2020-08-11 |
| 公开(公告)号: | CN111982902A | 公开(公告)日: | 2020-11-24 |
| 发明(设计)人: | 罗丹;杜晓雪;牛小方 | 申请(专利权)人: | 南方科技大学 |
| 主分类号: | G01N21/84 | 分类号: | G01N21/84;C12Q1/6816;G01N21/41 |
| 代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 潘登 |
| 地址: | 518055 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 液晶 检测 探针 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种基于液晶的检测探针,其特征在于,所述检测探针包含基底层、连接在基底层上的核苷酸链A、通过碱基互补配对作用与所述核苷酸链A相连的核苷酸链B以及垂直排列在基底层上的向列相液晶。
2.根据权利要求1所述的检测探针,其特征在于,所述核苷酸链A修饰有氨基,与3-氨丙基三乙氧基硅烷通过戊二醛的胶联作用相连;
优选地,所述核苷酸链B通过静电作用与十二烷基三甲基溴化铵结合;
优选地,所述核苷酸链A与核苷酸链B形成8-17脱氧核酶体系;
优选地,所述核苷酸链A包含如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,所述核苷酸链B包含如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列;
优选地,所述核苷酸链A包含如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列,所述核苷酸链B包含如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列;
优选地,所述核苷酸链A包含如SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列,所述核苷酸链B包含如SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列;
优选地,所述基底层包括玻璃基底;
优选地,所述向列相液晶通过二甲基十八烷基[3-(三甲氧基硅基)丙基]氯化铵的锚定作用固定于所述玻璃基底表面。
3.一种如权利要求1或2所述的检测探针的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:
(1)使用预处理液处理基底层,再用胶粘剂处理所述基底层;
(2)将步骤(1)得到的基底层置于含有核苷酸链A和核苷酸链B的混合液中,反应;
(3)再将间隔网置于所述基底层上,注入向列相液晶后,再加入封端剂,得到所述检测探针。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述预处理液为3-氨丙基三乙氧基硅烷和二甲基十八烷基[3-(三甲氧基硅基)丙基]氯化铵的乙醇溶液;
优选地,所述3-氨丙基三乙氧基硅烷与乙醇的体积比为(0.5~1.5):1000;
优选地,所述二甲基十八烷基[3-(三甲氧基硅基)丙基]氯化铵与乙醇的体积比为(0.5~1.5):1000;
优选地,步骤(1)所述预处理液处理基底层的时间为20~40min,优选为30min;
优选地,步骤(1)所述胶粘剂为质量浓度为0.3~0.6%的戊二醛;
优选地,步骤(1)所述胶粘剂处理后还包括使用氮气风干的操作。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于,所述预处理液处理基底层前,还包括清洗基底层的操作;
优选地,所述清洗基底层时使用的溶液为食人鱼溶液;
优选地,所述清洗基底层的时间为20~40min,优选为30min;
优选地,所述清洗基底层的温度为105~120℃,优选为110℃。
6.根据权利要求3~5任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述混合液中核苷酸链A的浓度为100~500μM,优选为200μM;
优选地,步骤(2)所述混合液中核苷酸链B的浓度为100~500μM,优选为200μM;
优选地,步骤(2)所述反应的时间为0.5~2h,优选为1h;
优选地,步骤(2)所述温度的时间为30~40℃,优选为37℃;
优选地,步骤(2)所述反应结束后还包括使用去离子水清洗基底层的操作。
7.根据权利要求3~6任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述间隔网包括铜网;
优选地,步骤(3)中所述封端剂包括十二烷基三甲基溴化铵;
优选地,所述于十二烷基三甲基溴化铵溶液的摩尔浓度为5~20mM,优选为10mM。
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