[发明专利]一种新冠病毒抗体检测荧光试剂与制备方法有效
申请号: | 202010796340.5 | 申请日: | 2020-08-10 |
公开(公告)号: | CN112034179B | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
发明(设计)人: | 刘欢;徐可;李华曜;翟博慧;龙文博;李龙;胡志响;陈浩 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学;武汉大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/533 |
代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 许恒恒;李智 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 病毒 抗体 检测 荧光 试剂 制备 方法 | ||
1.一种新冠病毒抗体检测荧光试剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)合成可见光荧光胶体量子点;所述可见光荧光胶体量子点的尺寸为1~20nm,量子点表面有亲水配体,能够分散在水基溶液形成胶体;
(2)在所述可见光荧光胶体量子点的表面标记预先准备的新冠病毒抗原多肽,所述新冠病毒抗原多肽其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,该新冠病毒抗原多肽能够对目标病毒抗体即COVID-19新型冠状病毒特异性抗体产生特异性结合反应,从而得到表面对目标病毒抗体具有特异性结合反应的量子点荧光试剂;该量子点荧光试剂与目标病毒抗体产生特异性结合反应后,其荧光特性将发生变化。
2.如权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述量子点荧光试剂为能够对IgG具有特异性结合反应的IgG检测用量子点荧光试剂、能够对IgM具有特异性结合反应的IgM检测用量子点荧光试剂、或能够对IgA具有特异性结合反应的IgA检测用量子点荧光试剂。
3.如权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述量子点荧光试剂包括能够对IgG具有特异性结合反应的IgG检测用量子点荧光试剂、能够对IgM具有特异性结合反应的IgM检测用量子点荧光试剂、以及能够对IgA具有特异性结合反应的IgA检测用量子点荧光试剂中的至少1种。
4.如权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述可见光荧光胶体量子点具体为荧光波长在可见光范围内的不同的多种量子点;所述可见光荧光胶体量子点选自硒化镉胶体量子点、碲化镉胶体量子点、硒化镉/硫化锌核壳结构胶体量子点、铯铅溴钙钛矿量子点、铯铅碘钙钛矿量子点,其中,所述硒化镉/硫化锌核壳结构胶体量子点是以硒化镉为核、硫化锌为壳的核壳结构胶体量子点。
5.如权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,在所述可见光荧光胶体量子点的表面标记预先准备的病毒抗原多肽具体是采用交联法或配体交换法;
其中,所述交联法是使用戊二醛、琥珀酰亚胺-4-环已烷-1-碳酸酯(SMCC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)作为交联剂将病毒抗原多肽标记在量子点表面;所述配体交换法是将抗原多肽溶液直接与胶体量子点混合进行表面置换反应,使抗原多肽直接替换量子点表面的有机物配体而标记在量子点表面。
6.如权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,量子点经病毒抗原多肽标记后进行表面封闭;
所述表面封闭步骤是使用牛血清蛋白(BSA)将量子点表面蛋白质结合位点进行封闭。
7.如权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,量子点材料还经过纯化处理;
所述纯化处理步骤用超滤管将样品浓缩纯化,终产物复溶于缓冲液中。
8.如权利要求1-7任意一项制备方法制备得到的新冠病毒抗体检测荧光试剂。
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