[发明专利]几丁质酶基因、几丁质酶及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202010795529.2 | 申请日： | 2020-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN111996205A | 公开（公告）日： | 2020-11-27 |
| 发明（设计）人： | 王建荣;祝木金;王平;余思;曹革 | 申请（专利权）人： | 深圳润康生态环境股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/56 | 分类号： | C12N15/56;C12N9/42;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/26;C12P19/14;C12R1/84 |
| 代理公司： | 深圳中一联合知识产权代理有限公司 44414 | 代理人： | 郝文婷 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市宝安区西乡*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 几丁质 基因 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种几丁质酶基因chiam，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种几丁质酶ChiAm，其特征在于，所述几丁质酶ChiAm是权利要求1所述几丁质酶基因chiam编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.一种重组表达载体，其特征在于，包括权利要求1所述的几丁质酶基因chiam。
4.一种重组表达菌株，其特征在于，包括权利要求3所述的重组表达载体。
5.一种几丁质酶ChiAm的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
提供几丁质酶基因chiam、表达载体和表达菌株；
对所述几丁质酶基因chiam进行扩增，所得扩增产物与所述表达载体进行连接，得到重组表达载体；
将所述重组表达载体转入表达菌株，得到重组表达菌株；
对所述重组表达菌株进行培养，得到几丁质酶ChiAm；
其中，所述几丁质酶基因chiam的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述几丁质酶ChiAm的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
6.根据权利要求5所述几丁质酶ChiAm的制备方法，其特征在于，将所述几丁质酶基因chiam进行扩增的步骤中，用于扩增的引物包括正向引物和反向引物，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
7.根据权利要求5所述几丁质酶ChiAm的制备方法，其特征在于，所述表达载体为毕赤酵母表达载体。
8.根据权利要求5所述几丁质酶ChiAm的制备方法，其特征在于，所述表达菌株为毕赤酵母表达菌株。
9.权利要求2所述几丁质酶ChiAm或权利要求5-8任一项所述几丁质酶ChiAm的制备方法制备得到的几丁质酶ChiAm在水解几丁质中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，在所述水解几丁质的反应中，所述反应的温度为30℃-60℃；和/或
所述反应的pH为3.0-8.0。
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