[发明专利]牛免疫球蛋白（IgG）双抗体夹心胶体金免疫层析试纸条、制备方法、试剂盒和检测方法

说明书

本发明提供了一种牛免疫球蛋白(IgG)双抗体夹心胶体金免疫层析试纸条、制备方法、试剂盒和检测方法。胶体金免疫层析试纸条，其特征是，包括底板、以及重叠设置在PVC底板上的吸水垫、层析膜、结合物释放垫和样品垫，结合物释放垫上包被有胶体金标记的牛免疫球蛋白抗体a复合物，层析膜上设有一条检测线和一条质控线，所述检测线包被有抗牛免疫球蛋白抗体b，所述质控线包被有羊抗鼠IgG。本发明同时提供了所述层析试纸条的制备方法，和包括该试剂条的试剂盒，以及该试剂盒进行检测的方法。本发明的技术方案基于双抗体夹心胶体金显色以及金标免疫分析仪定量的原理制成，可用来快速定量检测牛免疫球蛋白(IgG)含量。

技术领域

本发明涉及检测试剂条、试剂盒领域，尤其涉及一种牛免疫球蛋白(IgG) 双抗体夹心胶体金免疫层析试纸条，该试剂条的制备方法，和包括该试剂条的试剂盒，以及该试剂盒进行检测的方法。

背景技术

免疫球蛋白Ig是机体免疫系统中的重要组成部分，普遍存在哺乳动物的血液、乳汁、初乳及淋巴液中，一般分为IgG、IgA、IgD、IgM、IgE等五大类。随着对牛免疫球蛋白的分离技术不断进步，人们对牛免疫球蛋白的生物学功能认识也不断深入，其富含优质蛋白、维生素和矿物质等营养元素，可以调节动物的免疫功能，增强机体抵抗力，因此在食品中的应用也越来越广泛，从牛乳中分离的牛免疫球蛋白(IgG)已经成为婴幼儿配方奶粉及各种乳制品、保健品的重要添加成分。由于IgG的含量直接决定了各种配方产品的质量和价格，因此对此类产品中的牛免疫球蛋白(IgG)含量的检测极为重要。

目前，用来检测牛免疫球蛋白(IgG)含量的方法主要分为仪器方法和免疫学方法两大类，仪器法主要包括紫外分光光度法，电泳法和高效液相色谱法，仪器法都具有检测准确率高，可重复的特点，但是仪器法耗时长，对设备和人员的要求高；免疫学检测方法主要包括酶联免疫分析法(ELISA)、免疫双向扩散法、荧光免疫分析法，想较于仪器方法，免疫学检测方法具有检测通量高，方便的特点，但是灵敏度不高、步骤复杂，胶体金免疫层析法由于其快速方便，检测结果直观的特点，已被广泛应用于药物和疾病检测领域，在对样品进行前处理后，只需10-15min，即可得到检测结果，结合检测仪，更是可以对样品的含量进行定量，在牛免疫球蛋白(IgG)检测领域，未见胶体金检测方法的报道。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中的牛免疫球蛋白(IgG)检测领域的上述不足之处，且无法实现高通量处理的不足之处，提供一种牛免疫球蛋白(IgG)双抗体夹心胶体金免疫层析试纸条、制备方法、试剂盒和检测方法，可对样品中的牛免疫球蛋白实现快速定量检测，极大的缩短了检测时间，并可实现大批量样品的快速准确筛查。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的一种牛免疫球蛋白(IgG)双抗体夹心胶体金免疫层析试纸条，包括底板、以及重叠设置在底板上的吸水垫、层析膜、结合物释放垫和样品垫，结合物释放垫上包被有胶体金标记的牛免疫球蛋白抗体a复合物，层析膜上设有一条检测线和一条质控线，所述检测线包被有抗牛免疫球蛋白抗体b，所述质控线包被有羊抗鼠IgG。

作为优选，层析膜上的检测线包被有浓度为0.5-2mg/mL的抗牛免疫球蛋白抗体b，层析膜上的质控线包被有浓度为0.5-1mg/mL的羊抗鼠IgG。

作为优选，所述抗牛免疫球蛋白抗体a和抗牛免疫球蛋白抗体b同为抗牛免疫球蛋白单克隆抗体或抗牛免疫球蛋白多克隆抗体或抗牛免疫球蛋白重组抗体中的一种。

作为优选，所述抗牛免疫球蛋白抗体a和抗牛免疫球蛋白抗体b同为抗牛免疫球蛋白单克隆抗体。