[发明专利]一种杜梨耐盐基因、蛋白及重组载体和应用

说明书

本发明公开了一种杜梨耐盐基因、蛋白及重组载体和应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述耐盐基因PbbHLH67的序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将该基因构建超表达载体和沉默载体，通过农杆菌介导的遗传转化分别使其在拟南芥中稳定遗传和在杜梨中瞬时转化表达，对获得的阳性植株苗进行耐盐功能验证。结果显示，PbbHLH67基因能够有效的增加植株的耐盐性。该基因的发现，为植物抗逆分子育种提供了新的基因资源，为我国乃至世界盐碱地植物培育提供参考，有利于提高我国盐碱地利用率。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种杜梨耐盐基因、蛋白及重 组载体和应用。

背景技术

梨作为世界主栽果树之一，在中国其种植面积和产量仅次于苹果和柑 橘，出口量占世界第一，是我国重要的果树经济作物。我国梨的栽培品种丰 富，主要涉及白梨、西洋梨、砂梨、秋子梨，多分布在中国华北、东北、西 北及长江流域地区，其中白梨、砂梨、秋子梨都原产于中国，我国是梨属植 物中心发源地之一。因其拥有广泛的栽培地域，导致梨在生长发育的过程中 经常遭受环境因素的影响，如干旱、低温和盐碱等。因此，是否能培育出优良的抗逆新品种便成为了梨产业发展最至关重要的因素。梨属于蔷薇科多年 生木本果树，其生长周期长且具有自交不亲和的特点，因此用传统的育种方 法不能高效的获得优良品种。所以，如何快速获得抗逆梨品种并快速应用于 生产，成为当前育种学家们的又一重要难题。近年来，随着分子生物学技术 的不断发展，挖掘抗性基因从而快速培育梨抗逆新品种成为一种必不可少的 技术。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种杜梨耐盐基因、蛋白及重组载体 和应用，所述PbbHLH67基因具有增强植物抵御盐害的功能，将PbbHLH67 在植物中超表达，能有效提高植物的抗盐性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种杜梨耐盐基因PbbHLH67，所述耐盐基因PbbHLH67 的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了上述耐盐基因PbbHLH67的编码蛋白，所述编码蛋白的 氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了一种扩增上述耐盐基因PbbHLH67的引物对，所述引物 对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所 示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

本发明还提供了一种包括上述耐盐基因PbbHLH67的重组载体，所述重 组载体以PCMBIA1300为基础载体，所述耐盐基因PbbHLH67位于所述基 础载体的XbaI和BamHI多克隆位点之间。

本发明还提供了上述耐盐基因PbbHLH67或上述引物对或上述重组载 体在调节植物耐盐性中的应用。

优选的，所述调节包括提高。

本发明还提供了上述耐盐基因PbbHLH67或上述引物对或上述重组载 体在培育耐盐植物株系中的应用。

优选的，所述植物包括拟南芥或杜梨。

本发明提供了一种杜梨耐盐基因PbbHLH67，将杜梨实生苗置于盐胁迫 环境中，随着盐胁迫时间的延长，所述耐盐基因PbbHLH67的表达量相应升 高，表明所述耐盐基因PbbHLH67响应盐胁迫处理，具有调控抗盐功能。