[发明专利]长链非编码RNA作为生物标志物在造影剂致急性肾损伤诊断中的应用

说明书

本发明主要提供lncRNA生物标志物在造影剂致急性肾损伤(CI‑AKI)诊断中的运用，通过illumina测序和RT‑qPCR筛选出了CI‑AKI患者全血中表达差异的两种长链非编码RNA(long non‑coding RNAs,lncRNAs)来作为CI‑AKI的诊断生物标志物。所述的lncRNA为lnc‑HILPDA和lnc‑PRND，在CI‑AKI患者全血中表达显著，预测效能高，且具有较高的灵敏度和准确度。进一步，本发明公开了所述的两种lncRNA标志物可制成CI‑AKI诊断试剂盒，为CI‑AKI的诊断提供有力的分子生物学工具，具有深远的临床意义和推广应用前景。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及两种作为长链非编码RNA生物标志物在造 影剂致急性肾损伤中诊断治疗的运用，所述两种lncRNA分别为lnc-HILPDA和 lnc-PRND。

背景技术

造影剂所致急性肾损伤(contrast-induced acute kidney injury,CI-AKI)是指血管内给予碘化造影剂后几天内的肾功能的下降，是心导管插入术常见的并发 症。到目前为止，因造影剂而造成肾脏损害的患者预计达到数百万人，增加了 巨大的疾病负担。因此，CI-AKI的早期诊断十分重要。目前研究者广泛使用血 清肌酐作为急性肾损伤的检测指标，KDIGO工作组提出了“造影剂所致急性肾损 伤”这一术语，并建议以使用造影剂后7日内出现的血清肌酐1.5倍的增加或者 超出基线水平作为定义的依据；或以在使用造影剂后48小时内血清肌酐水平增 加超出基线值至少0.3mg/dl(26.5μmol/L)为定义的依据；或以在使用造影剂 后每小时尿量少于0.5ml/kg并持续6小时以上作为定义的依据。此定义里的血清肌酐的特异性较差，因为血清肌酐受体液转移和药物效应的影响而产生波动。 另外血清肌酐的不敏感性和迟发性以及准确的新型生物标志物的缺失也给 CI-AKI的早期检测带来了很大的挑战。此外，由于CI-AKI的关键分子机制和 调控网络仍不清楚，应用生理盐水水化等经典预防策略的有效性存在争议和局 限性，缺乏特定的靶向药物。因此，筛选潜在的生物标志物并揭示关键的分子 发病机制可能是CI-AKI的基石。

长链非编码RNA(Long non-coding RNAs，lncRNAs)是一种含有200多个 核苷酸，主要存在于真核生物中，不编码蛋白质的RNA。它具有广泛的生物学 过程，参与调控机体生长、发育和疾病发生等许多生命活动。由于其高度的特 异性、体液的稳定性和可检测性，lncRNAs可以作为预测各种疾病的新型生物 标志物。目前在CI-AKI领域中，lncRNAs作为新型生物标志物的研究为数不多， 亟需进一步地去研究和探讨。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供长链非编码RNA作 为生物标志物在制备诊断造影剂致急性肾损伤试剂中的应用以及包含能检测本 发明所述长链非编码RNA的检测引物。

一方面本发明提供了长链非编码RNA作为生物标志物在制备诊断造影剂致 急性肾损伤试剂中的应用。

优选地，所述长链非编码RNA包括lnc-HILPDA或/和lnc-PRND。

另一方面发明提供了一种检测造影剂致急性肾损伤的产品，所述产品包括 用于检测长链非编码RNA lnc-HILPDA或/和lnc-PRND的引物。

优选地，所述产品为诊断试剂或试剂盒。

优选地，所述诊断试剂或试剂盒包括对lnc-HILPDA或/和lnc-PRND具有检 测特异性的探针、基因芯片或PCR引物。

优选地，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示，其中用于检测 lnc-HILPDA的引物为如SEQ ID NO：1～2所示的核苷酸序列，用于检测lnc-PRND 的引物为如SEQID NO：3～4所示的核苷酸序列。

优选地，所述试剂盒还包括内参基团、cDNA模板、Taqman DNA聚合酶、 阳性对照液、阴性对照液、荧光染料、dNTP。