[发明专利]一种EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF多酶杂化纳米花及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202010772583.5 | 申请日： | 2020-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN112111481B | 公开（公告）日： | 2022-06-03 |
| 发明（设计）人： | 韩娟;王赟;李媛媛;周阳;罗鹏;唐超凡;罗湘;翟琪 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12N11/18 | 分类号： | C12N11/18;C12N11/14;C12N9/24;C12P19/02 |
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| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 egleh cbhleh gleh nf 多酶杂化 纳米 及其 制备 方法 应用 | ||
1. 一种EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF 多酶杂化纳米花的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将EGLEH、CBHLEH和GLEH三种酶溶于PBS中，然后加入CuSO4溶液混合，使得混合溶液中Cu2+为一定的浓度，然后固定化一段时间，固定化完成后离心分离EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF多酶杂化纳米花，并用去离子水洗涤未固定的EGLEH、CBHLEH和GLEH；所述EGLEH、CBHLEH和GLEH在PBS中的终浓度比例为1~2.5:1:1~2.5；所述EGLEH为重组内切葡聚糖酶，CBHLEH为重组外切葡聚糖酶，GLEH为β-葡萄糖苷酶；
所述EGLEH、CBHLEH和GLEH三种酶在混合溶液中的总浓度为0.2-1 mg/mL；
所述混合溶液中Cu2+含量为1-6 mM。
2.根据权利要求1所述的EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF 多酶杂化纳米花的制备方法，其特征在于，所述EGLEH、CBHLEH和GLEH在PBS中的终浓度比例为2.5:1:1。
3. 根据权利要求1所述的EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF 多酶杂化纳米花的制备方法，其特征在于，所述EGLEH、CBHLEH和GLEH三种酶在混合溶液中的总浓度为0.5 mg/mL。
4. 根据权利要求1所述的EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF 多酶杂化纳米花的制备方法，其特征在于，所述PBS的浓度为10mM，pH为7.4。
5. 根据权利要求1所述的EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF 多酶杂化纳米花的制备方法，其特征在于，所述固定化条件为：在4~55℃下固定0.5~24h。
6. 权利要求1~5任一种所述方法制备的EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF 多酶杂化纳米花，其特征在于，所述杂化纳米花具有多级层状结构，其中酶分散固定在杂化纳米花的片层上，总体呈高结晶度的花状。
7. 权利要求1所述的EGLEH-CBHLEH-GLEH-NF 多酶杂化纳米花降解微晶纤维素转化为葡萄糖的用途。
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