[发明专利]一种干细胞3D仿真培养用增殖培养基

说明书

本发明涉及一种干细胞3D仿真培养用的增殖培养基，无血清添加，组成成份明确，适合于干细胞3D仿真灌流培养，包括：无机盐、氨基酸、糖类、脂类、核苷类、维生素、细胞代谢物、细胞增殖因子、水，培养液的渗透压为270‑330 mOsmol/kg·H₂O，培养液的酸碱度pH7.2‑7.4。

技术领域

本发明属于医药领域，特别涉及一种3D仿真培养用增殖培养基。

背景技术

胚胎干细胞是一种原始未分化的细胞，具有无限增殖能力与无限分化潜能，是当代医学进步与医疗提效的核心趋动力。间充质干细胞与成体干细胞是当前最热门的干细胞研究方向，具有取得容易、易于放大培养、分化能力强、可调控免疫的优点，因而在再生医学以及干细胞治疗方面取得较大进展并显示出巨大的市场应用潜力。

基于培养皿和培养瓶的2D培养技术为干细胞培养做出巨大贡献，完成了干细胞从人体向体外培养的技术过渡，当前正在向3D方向发展。由于2D培养技术是基于静止培养的扩增模式，造成2D培养获得的细胞进入人体后不适应人体的运动生理过程，干细胞产业向3D仿真培养技术过渡。由于当前市场上的培养基都是为基于培养皿和培养瓶的2D培养技术设计，缺少针对干细胞3D仿真培养的培养基。另外，许多干细胞培养基使用成份不清楚的细胞裂解液（或细胞器裂解液），极个别还在使用动物血清成份，对于传染病的交叉感染预防和对于干细胞作用机制研究都有较大影响。

干细胞产业急需要组成清楚、无不明物质添加、使用效果好、价格便宜的3D仿真培养用增殖培养基。

发明内容

鉴于以上的问题，本发明提供了一种干细胞3D仿真培养用增殖培养基，具有组成清楚、使用效果好、价格便宜特点，并且是基于大量的干细胞3D仿真培养实验数据统计分析形成，能够解决干细胞产业发展亟需的干细胞3D仿真培养用增殖培养基难题。

本发明提供一种干细胞3D仿真培养用增殖培养基，其特征在于，包括：无机盐、氨基酸、糖类、脂类、核苷类、维生素、干细胞代谢物、干细胞增殖因子、水，组成成份完全已知，不使用血清，培养液的渗透压为270-330 mOsmol/kg·H₂O，培养液的酸碱度pH7.2-7.4。

优选地，其特征在于，无机盐由多种阳离子与多种阴离子组成，包括细胞生长增殖需要的钾、钠、钙、镁、铁等阳离子，包括碳酸氢根、硫酸根、磷酸根和氯离子等阴离子，其中，钾离子0.01%-0.03%、钠离子0.2%-0.6%、钙离子0.003%-0.02%、镁离子0.0002%-0.001%、铁离子0.00005%-0.0002%，碳酸氢根离子0.1%-0.5%、硫酸根离子0.0005%-0.005%、磷酸根离子0.005%-0.05%、氯离子0.4%-0.6%。

优选地，其特征在于，培养基中包括20种天然氨基酸，其中，丙氨酸0.0005%-0.01%、精氨酸0.0005%-0.03%、天冬酰胺0.0005%-0.01%、天冬氨酸0.0005%-0.01%、半胱氨酸0.0005%-0.01%、谷氨酰胺0.0005%-0.1%、谷氨酸0.0005%-0.01%、甘氨酸0.0005%-0.01%、组氨酸0.0005%-0.01%、异亮氨酸0.0005%-0.01%、亮氨酸0.0005%-0.01%、赖氨酸0.0005%-0.01%、甲硫氨酸0.0005%-0.01%、苯丙氨酸0.0005%-0.01%、脯氨酸0.0005%-0.01%、丝氨酸0.0005%-0.01%、苏氨酸0.0005%-0.01%、色氨酸0.0005%-0.01%、酪氨酸0.0005%-0.01%、缬氨酸0.0005%-0.01%。

优选地，其特征在于，培养基中的糖类包括葡萄糖并以丙酮酸钠进行辅助，其中，葡萄糖0.005%-0.5%、丙酮酸钠0.005%-0.05%。