[发明专利]一种二裂酵母发酵溶胞物的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种精华液，其特征在于，由A组分、B组分和C组分组成，所述A组分由去离子水75.1%、EDTA二钠0.02%、尿囊素0.15%、甘油4.00%、羟苯甲酯0.15%、卡波姆3.00%、透明质酸钠0.05%、甜菜碱3.00%、小核菌胶0.05%、丁二醇4.00%组成，所述B组分为二裂酵母发酵溶胞物10.00%、羧甲基β-葡聚糖钠0.10%、精氨酸0.08%的混合物，C组分为苯氧乙醇0.30%；

其中，所述二裂酵母发酵溶胞物的制备方法包括如下步骤：

步骤1：将长型双歧杆菌接种于种子培养基中厌氧发酵培养，得到种子液；所述种子培养基的质量配比为脱脂奶粉5.0%、葡萄糖1.5%、酵母粉1.5%、硫酸铵1.3%、磷酸二氢钾0.3%、磷酸氢二钾1.1%、异乳糖0.8%、水88.5%；

步骤2：将培养好的种子液接种于已灭菌处理的发酵培养基中厌氧发酵培养，然后巴氏灭菌30min，低温离心收集菌体；所述发酵培养基的质量配比为：葡萄糖2.0%、酪蛋白胨1.5%、酵母粉1.5%、牛肉蛋白胨1.0%、水解乳蛋白1.5%、乙酸钠0.5%、柠檬酸三铵0.2%、吐温-80 0.1%、MgSO₄0.05%、MnSO₄ 0.02%、K₂HPO₄ 0.05%；

步骤3：将蒸馏水加入至菌体中混合，破壁处理释放出营养物质；所述菌体与蒸馏水的体积比为1.0：1.0～6.0；

步骤4：在步骤3中破壁后的溶液加入助剂，得到发酵溶胞物；

步骤1所述长型双歧杆菌的接种量是种子培养基质量的6%，培养温度为38～39℃，时间为20～30h；

步骤2所述厌氧发酵的种子液发酵接种量是发酵培养基质量的6%，种子液的发酵初始pH为6.6～7.0，厌氧发酵的培养温度为38～39℃，时间为9～10h；所述巴氏灭菌的温度为60～65℃；

步骤3所述破壁处理为在冰浴条件下高速均质破壁处理，均质破壁压力为120～130bar，温度为-4～0℃；或为在冰浴条件下超声波分解处理，破碎细胞壁，超声5～6s/次，循环10～20次。

2.根据权利要求1所述精华液，其特征在于，步骤4所述助剂为防腐剂和悬浮剂。

3.根据权利要求2所述精华液，其特征在于，所述悬浮剂采用悬浮剂SF-1或者化妆品级卡波姆，所述悬浮剂加入量是溶液质量的1～2%；所述防腐剂采用对羟基苯乙酮或者苯酚磺酸锌，所述防腐剂加入量是溶液质量的0.3～0.9%。