[发明专利]CD40L核酸适配体在制备抗aGVHD效应的药物中的应用

说明书

本发明公开了CD40L核酸适配体在制备抗aGVHD效应的药物中的应用，属于生物医学技术领域。本申请的发明人经过试验发现，C40L核酸适配体在小鼠体内可以长时间循环并不影响其生存，能够预防aGVHD的发生发展，而且促进移植后小鼠的造血重建和免疫力的恢复，在免疫重建优于临床药物ATG。因此，CD40L核酸适配体可以用于制备抗aGVHD效应的药物，既开辟了CD40L核酸适配体新的应用领域，也开辟了新的抗aGVHD效应的药物，具有广阔的应用空间。

技术领域

本发明涉及CD40L核酸适配体在制备抗aGVHD效应的药物中的应用，属于生物医学技术领域。

背景技术

异基因造血干细胞移植(Allogeneic Hematopoietic Stem CellsTransplantation, allo-HSCT)是治愈白血病等恶性血液病、重症再生障碍性贫血和遗传性血液病的最有效方法。当前制约allo-HSCT疗效的最主要因素是其术后并发症移植物抗宿主病(Graft Versus Host Disease,GVHD)，GVHD不仅影响移植后生存，还严重影响患者的生活质量。依据人类白细胞抗原(Human Leukocyte Antigen,HLA)相合程度和供者来源等不同，移植后大约30％-80％的受者出现急性GVHD(Acute Graft Versus Host Disease,aGVHD)；30％-70％存活100天以上的受者可出现慢性GVHD(Chonic Graft Versus HostDisease,cGVHD)。近半数患者直接或间接因GVHD而致死。

aGVHD的发生是一个复杂的病理过程，至今没有完全阐述清楚，Ferrara和deeg 等人将发病进程总结为三个阶段：1)启动：移植前预处理方案中的放疗或化疗造成组织损伤，诱发炎症介质释放，如细胞因子TNF-a、IL-6、IL-1等；它们不但增强主要组织相容性复合体(MHC)蛋白的表达信号，还促使抗原提呈细胞(APC)的活化及共刺激分子的表达。2)活化与扩增：供者受者活化的抗原提呈细胞同时活化幼稚T细胞，促其分化为效应T细胞、记忆性T细胞、细胞毒性T细胞等。3)效应：活化的供体T 细胞迁移到aGVHD靶器官(肝、肺、肠、皮肤等)通过Fas/FasL、穿孔素、颗粒酶及细胞因子攻击受者靶器官。最近一些新的研究表明:中性粒细胞也为GVHD发生发展做贡献，通过裂解趋化因子和产生活性氧族来促进T细胞活化，增强预处理方案引起的组织损伤。有报道说肠道浸润的中性粒细胞水平与肠道GVHD的严重程度息息相关。更有发现证明GVHD的严重等级与靶器官浸润的白细胞数量有关，特别是T细胞(CD4⁺)和中性粒细胞。

迄今，预防和治疗GVHD的工作不断有新的研究发现，各种类型的药物相继出现免疫抑制剂如抗人胸腺免疫球蛋白(ATG)、环磷酰胺等，信号通路阻断剂如硼替佐米、 CTLA4-Ig等；还有一些调节表观遗传学、细胞自杀基因疗法等。这些方法多可以改善 GVHD，但是彻底治愈的手段还需要进一步研究。

大量研究表明CD40-CD40L信号通路是激活T细胞的重要共刺激信号之一，它们相互作用能够刺激抗原提呈细胞，增强其他共刺激信号如B7的表达。1996年，Larsen等率先在小鼠心脏移植模型中发现应用抗CD40L单克隆抗体(monoclonal antibody，mAb)阻断CD40-CD40L信号通路可预防急性排斥反应及自身反应性抗体的产生。Guillonneau等在大鼠的心脏移植中，通过给移植心脏局部注射CD40Ig，发现可以诱导受体移植物长期存活，产生Treg细胞，诱导CD8+CD45RClow Treg的发育，该细胞可以介导移植免疫耐受，确保移植物在受体中长期存活。2000年，Brossart等报道了可溶性CD40L信号传导可以诱导RelB核定位，并抑制IL-10R上调，促使CD83+树突细胞(DC)成熟，考虑阻断CD40-CD40L这条通路可以增强IL-10对DC功能的抑制作用，减低免疫排斥作用。

探索至今在啮齿动物中，CD40L单抗阻断CD40/CD40L通路诱导外周和中枢耐受，建立稳定嵌合体诱导持久免疫耐受效果明显。但是，随之而来的非人类灵长类动物肾移植血栓病发症中止了它的应用前景。