[发明专利]一种成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜的鉴别方法

说明书

本发明涉及一种成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜的鉴别方法。该方法包括以下步骤：1)测定成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜中的癸二酸和癸烯二酸；2)计算蜂蜜的R值；3)根据R值鉴别成熟蜂蜜与未成熟蜂蜜。本发明具有鉴别结果准确，方法用时短，技术简单可靠，重复性强的特点。

技术领域

本发明属于食品检测领域，具体涉及一种成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜的鉴别方法。

背景技术

蜂蜜的质量问题一直受到国内外业界的高度关注。近年来，我国养蜂生产存在“先取稀蜜后浓缩”的生产方式，这种方式生产的蜂蜜水分含量高、易发酵、花香味淡，属于未成熟蜂蜜。国际上把我国生产的未成熟蜂蜜称为水蜂蜜和假蜂蜜，是劣质蜂蜜和廉价蜂蜜的代名词，出口价格与其他国家差距较大，严重影响我国蜂产品的国际声誉和产业发展。因此，成熟蜂蜜的生产是提升蜂蜜质量水平的必由之路。

蜂蜜的成熟过程是由蜜蜂采集植物花蜜并结合自身分泌物进行转化、发酵最终成熟的复杂生物转化过程。已有研究表明，经过充分酿造的天然封盖成熟蜂蜜的营养品质和功能均优于未经充分酿造的非成熟蜂蜜。在蜂蜜成熟过程中，水分和蔗糖等物质含量降低，果糖和蛋白质含量升高。但已发现蜂蜜中至少存在180多种物质，因此仅研究某几个常规的理化指标难以有效区分成熟蜂蜜与非成熟蜂蜜，因而有必要建立蜂蜜真实性鉴别的新方法，保证蜂蜜质量和可追溯性。

目前，现代蜂蜜鉴别检测技术主要有色谱、质谱、色谱质谱联用、核磁共振波谱技术等，但大多用于蜂蜜的植物源和地理源鉴别，尚无有效方法鉴别成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜。我们在前期调查研究中发现，一些蜂源性游离脂肪酸在蜂蜜成熟过程中发生显著变化，因此提出了一种成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜的鉴别方法。

发明内容

为解决背景技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种鉴别结果准确的成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜的鉴别方法。

本发明的技术解决方案是：本发明为一种成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜的鉴别方法，其特殊之处在于：该方法包括以下步骤：

1)测定成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜中的癸二酸和癸烯二酸；

2)计算蜂蜜的R值；

3)根据R值鉴别成熟蜂蜜与未成熟蜂蜜。

优选的，步骤1)中的具体步骤如下：

1.1)分别将成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜加蒸馏水溶解得蜂蜜水溶液，用正己烷-乙醚溶液萃取该蜂蜜水溶液；

1.2)混匀、静置、分层后，收集上层有机相进行减压浓缩，得提取物；

1.3)用硫酸甲醇溶液溶解所得提取物，在恒温水浴中进行甲酯化；

1.4)向甲酯化物中加入饱和氯化钠溶液和正己烷，充分混匀、静置、分层后，收集上层液体并经氮气吹干；

1.5)随后加入正己烷溶解，经微孔滤膜过滤后通过GC-MS检测。

优选的，步骤1)中的具体步骤如下：

1.1)将10.0g成熟蜂蜜和未成熟蜂蜜分别放入装有200mL蒸馏水的烧杯中，并在室温下进行超声处理，将所得混合物转移到分液漏斗中，用80ml正己烷-乙醚混合溶液(v/v，2:1)萃取；

1.2)然后将溶液混匀，静置10min，将上层有机相收集到圆底烧瓶中；重复提取三次；收集的溶液在25℃的旋转蒸发器中减压浓缩，直到获得提取物；

1.3)用5mL 1％H2SO4-CH3OH溶液完全溶解提取物并转移至20mL小瓶中，然后用薄膜密封并在50℃恒温水浴中甲酯化40min；

1.4)甲酯化后，向小瓶中添加3mL饱和NaCl溶液和5mL正己烷，然后涡旋振荡混匀并停留10分钟，收集上层并在25℃下用氮气流干燥；