[发明专利]两个定点敲除水稻OsPLS4基因的sgRNA的oligo DNA组在审
| 申请号： | 202010746999.X | 申请日： | 2020-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN111876413A | 公开（公告）日： | 2020-11-03 |
| 发明（设计）人： | 周大虎;徐杰;贺浩华;姜志树;李婷;林小玲;范寒雨;马莹莹;朱昌兰;彭小松;陈小荣;付海辉;欧阳林娟 | 申请（专利权）人： | 江西农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/113;C12N15/82;C12Q1/6895;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 深圳市鼎浩知识产权代理有限公司 44544 | 代理人： | 张炬杰 |
| 地址： | 330000 江*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 两个 定点 水稻 ospls4 基因 sgrna oligo dna | ||
1.两个定点敲除水稻OsPLS4基因的sgRNA的oligo DNA组，其特征在于：包括OsPLS4基因的两个sgRNA的靶位点，其DNA序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，一个oligo DNA组为PLS4(1)F和PLS4(1)R，另一个oligo DNA组为PLS4(2)F和PLS4(2)R，PLS4(1)F核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，PLS4(1)R核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，PLS4(2)F核苷酸序列如SEQID NO.5所示，PLS4(2)R核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
2.如权利要求1所述的两个定点敲除水稻OsPLS4基因的sgRNA的oligo DNA组在水稻OsPLS4基因编辑育种中的应用。
3.一种定点敲除水稻OsPLS4基因的sgRNA的载体，其特征在于，该载体为pYL-Hs-PLS4-cas9，该载体通过将oligo DNA组PLS4(1)F和PLS4(1)R、PLS4(2)F和PLS4(2)R混合，通过退火反应形成二聚体结构，然后与线性化pHY-HS载体片段连接，构建含有水稻OsPLS4基因两个靶序列的pYL-Hs-PLS4-cas9质粒，PLS4(1)F核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，PLS4(1)R核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，PLS4(2)F核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，PLS4(2)R核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
4.一种鉴定OsPLS4基因的sgRNA靶区域编辑情况的引物对，其特征在于：该引物对的DNA序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。
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