[发明专利]一种用四膜虫监测离子液体毒性的方法在审
| 申请号： | 202010744516.2 | 申请日： | 2020-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN111996229A | 公开（公告）日： | 2020-11-27 |
| 发明（设计）人： | 崔银花;谢小保;施庆珊;王玲玲 | 申请（专利权）人： | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;C12R1/90 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 陈洁娣;刘明星 |
| 地址： | 510070 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 四膜虫 监测 离子 液体 毒性 方法 | ||
1.一种离子液体的毒性监测方法，其特征在于，离子液体处理四膜虫后通过PI/SYTO染色法检测四膜虫的致死，判断离子液体的毒性大小。
2.根据权利要求1所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，包括以下步骤：将四膜虫收集于毒性检测缓冲液，固定后，调整四膜虫浓度至20～150万个/mL，加入离子液体进行致毒处理，然后加入SYTO和PI染色，离心收集染色后的四膜虫，使用酶标仪或荧光分光光度计进行检测，根据PI/SYTO比例，判断离子液体的毒性大小。
3.根据权利要求1或2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，所述的四膜虫为梨形四膜虫(Tetrahymena pyriformis)或嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)。
4.根据权利要求2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，所述的收集的四膜虫为生长阶段在指数期或稳定期早期，且培养时间相同的四膜虫。
5.根据权利要求2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，所述的毒性检测缓冲液为pH＝7.4的10mM Tris-HCl缓冲液，磷酸盐缓冲液或Dryl’s缓冲液。
6.根据权利要求2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，所述的固定是使用4％甲醛或戊二醛固定。
7.根据权利要求2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，所述的致毒处理是在室温或26～31℃下处理0.5～8h。
8.根据权利要求2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，所述的SYTO和PI的染色浓度分别为0.1～10μM和0.1～10μg/mL，所述的染色是在黑暗条件下室温或26～31℃反应5～60min。
9.根据权利要求2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，所述的离心是在1500～10000rpm室温离心1～15min。
10.根据权利要求2所述的离子液体的毒性监测方法，其特征在于，PI/SYTO比例越大表示受毒四膜虫的比例越高，离子液体的毒性越大。
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