[发明专利]一种连花清瘟药物相关代谢产物的分离和结构鉴定方法

权利要求书

1.一种连花清瘟药物相关代谢产物的分离方法，其中，所述方法包括利用如下色谱条件对给药连花清瘟药物的个体体液中的相关代谢产物进行分离：

色谱柱：C18色谱柱；

流动相：A：0.1％甲酸水溶液，B：乙腈，A和B体积比为(98-5)：(2-95)；

流速：0.2-0.3mL/min；

柱温：30-40℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法还包括以如下流动相梯度进行洗脱：

0-3min：2％-2％B、3-4min：2％-5％B、4-6min：5％-5％B、6-9min：5％-10％B、9-14min：10％-15％B、14-18min：15％-20％B、18-25min：20％-30％B、25-28min：30％-95％B、28-32min：95％-95％B、32min：95％-5％B、32-37min：5％-5％B。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述方法还包括以如下流动相梯度进行洗脱：

0-3min：2％-2％B、3-4min：2％-5％B、4-6min：5％-5％B、6-9min：5％-10％B、9-14min：10％-15％B、14-18min：15％-20％B、18-25min：20％-30％B、25-28min：30％-95％、28-32min：95％-95％、32.01min：95％-5％B、32.01-37min：5％-5％B；其中在B浓度升高的各时间段，B浓度分别是匀速升高。

4.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其中，所述色谱柱为ACQUITY UPLC CSHC18色谱柱。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的方法，其中，所述色谱条件还包括进样量为3μL。

6.根据权利要求1～5任意一项所述的方法，其中，所述方法包括利用色谱-质谱联用对给药连花清瘟药物的个体体液进行分离，其中质谱条件包括：正负离子检测模式；Full MS全扫描分辨率：70000；扫描质量范围：100-1200Da；Full ms/ddMS2碰撞能量：30eV；Full MS分辨率：35000；ddMS2分辨率：17500。

7.根据权利要求1～6任意一项所述的方法，其中，所述连花清瘟药物为连花清瘟胶囊或连花清瘟颗粒。

8.根据权利要求1～7任意一项所述的方法，其中，所述个体为哺乳动物个体，优选为人。

9.根据权利要求1～8任意一项所述的方法，其中，所述体液为血液和/或尿液。

10.根据权利要求1～9任意一项所述的方法，其中，所述方法包括将体液先用柱层析富集纯化，然后再进行分离。

11.根据权利要求1～10任意一项所述的方法，其中，所述方法包括将体液先用萃取柱富集纯化，然后再进行分离。

12.根据权利要求1～10任意一项所述的方法，其中，所述方法包括将体液先用柱层析富集纯化，用甲醇洗脱并干燥，得到的干燥物用甲醇复溶，离心取上清液进行分离。

13.根据权利要求1～12任意一项所述的方法，其中，所述体液来自于给药后第8天至第10天的个体。

14.根据权利要求13所述的方法，其中，当所述体液为血液时，所述体液为来自于给药后第8天的第10min、30min、1h、3h、6h、9h、12h、16h、25h和48h的个体的体液的混合；当所述体液为尿液时，所述体液为来自于给药后第8天的如下时间段的个体的体液的混合：0-4h、4-10h、10-24h、24-32h和32-48h。