[发明专利]一种以Clorf100为靶点的男性不育治疗方法

权利要求书

1.一种以Clorf100为靶点的男性不育治疗方法，其特征在于：包括如下步骤：

（一）正常睾丸组织采集：

在尸体肾移植时采集2例青壮年有孩子的睾丸组织，作为正常睾丸组织的对照；

（二）无精子症睾丸组织采集：

采集了手术显微取精的无精子症睾丸组织，作为异常组织的样品；

（三）样品分类：

根据病理结果将阻滞分为生精阻滞在精原细胞5例、阻滞在精母细胞阶段5例、阻滞在精子细胞阶段5例、唯支持细胞综合症5例，另选取5例梗阻性无精子症做对照，加上正常睾丸组织；

（四）样品对比：

应用基因芯片比较正常睾丸组织和非梗阻无精子症的睾丸组织可以看出，芯片质量控制良好，基因差异显著；

（五）试验：

设计合成C1orf100的特异性引物，行RT-PCR验证，发现C1orf100在正常睾丸组织及梗阻性无精子症病人的睾丸组织强表达，而且生精阻滞阶段越早，表达降低越显著，在唯支持细胞综合症几乎没有表达，设计合成C1orf100的Real-timePCR引物，行实时定量PCR扩增，标准曲线制作满意后，扩增模板，模板含量以CT值表示，CT值越高，表明扩增模板的含量越低，在唯支持细胞综合症无精子症扩增40个循环也未能扩增出，C1orf100在正常睾丸组织及梗阻性无精子症病人的睾丸组织强表达，而且生精阻滞阶段越早，表达降低越显著，蛋白杂交，从蛋白水平证实C1orf100在正常睾丸组织及梗阻性无精子症病人的睾丸组织强表达，而且生精阻滞阶段越早，表达降低越显著。

2.根据权利要求1所述的一种以Clorf100为靶点的男性不育治疗方法，其特征在于：所述步骤三中的样品分为生精阻滞在精原细胞5例、阻滞在精母细胞阶段5例、阻滞在精子细胞阶段5例、唯支持细胞综合症5例，另选取5例梗阻性无精子症做对照，加上正常睾丸组织，共27例。

3.根据权利要求1所述的一种以Clorf100为靶点的男性不育治疗方法，其特征在于：所述步骤三中样品中需要排除一些不能够进行使用的样品，明确的染色体异常的、AZF微缺失的和睾丸前因素的样品都排除在外。

4.根据权利要求1所述的一种以Clorf100为靶点的男性不育治疗方法，其特征在于：所述步骤四行基因芯片检测，评价为优良，获得差异表达基因。

5.根据权利要求1所述的一种以Clorf100为靶点的男性不育治疗方法，其特征在于：所述步骤五中C1orf100是与精子生成相关的分子标记，可以应用于诊断标记或治疗靶点，尤其对无精子症生精阻滞的治疗，最终治疗无精子症这类男性不育的诊断或治疗。