[发明专利]一种用于改善大鼠DCD供肝的常温机械灌注液

说明书

本发明属于医疗领域，尤其涉及一种用于改善大鼠DCD供肝的常温机械灌注液。本发明提供的灌注液包括L‑抗坏血酸、葡萄糖、肝素、胰岛素、L‑谷氨酰胺、抗生素和William’s medium E培养基。借助常温机械灌注平台，使用本发明提供的灌注液对大鼠DCD供肝在体外进行干预治疗，并对干预治疗过程中的组织形态、灌注液中相关酶与代谢物、相关细胞因子分泌情况等进行分析评价，结果显示：本发明提供的灌注液对大鼠DCD供肝有显著改善作用。本发明验证了富含L‑抗坏血酸等成分的常温机械灌注液对DCD边缘供肝改善的可行性，为临床肝移植中DCD边缘供肝的常温机械灌注干预治疗提供了参考与理论依据。

技术领域

本发明属于医疗领域，尤其涉及一种用于改善大鼠DCD供肝的常温机械灌注液。

背景技术

随着外科技术和免疫抑制剂的进步与发展，肝移植手术已成为终末期肝病的标准疗法。然而肝移植手术需求的增加使供肝短缺的问题逐渐凸显，供肝来源目前主要为脑死亡供体(donation after brain death，DBD)以及心脏死亡供体(donation after cardiacdeath，DCD)，DBD供肝其热缺血时间短，因而受缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusioninjury，IRI)小，移植后效果明显优于DCD供肝，因此国际上大多数中心主要采用DBD供肝，DCD供肝并没有得到充分的利用。而我国自2010年开始DCD器官捐献的试点工作并制定了相关指南，参考国际通用的Maastricht分类，中国标准分别为：中国一类(C-I)即国际DBD标准供体；中国二类(C-II)国际DCD标准供体，包含Maastricht I-V类；中国三类(C-III)脑-心双死亡供体(donation after brain death awaitingcardiac death，DBCD)，即在家属同意捐献的情况下，对符合脑死亡标准的供者，严格按照DCD供体的捐献程序实施。由于我国脑死亡立法尚未完善，C-III类符合我国国情，移植后效果良好,为现阶段器官捐献的主要方式。而如何充分利用C-II类即不可控制的DCD边缘供肝，充分缓解热缺血时间较长带来的IRI，以及随之而来的冷缺血时间加重IRI，是国内外扩大供肝池亟需解决的问题。

近年来，机械灌注在缩短冷缺血时间，以及体外干预治疗IRI上取得了良好的效果，其有效性及安全性得到广泛证明。Dutkowski等首次报告了携氧低温机械灌注后的DCD肝脏，其移植术后并发症以及移植物1年存活率(90％)要明显高于常规静态冷保存的DCD肝脏(69％)，并且与DBD肝脏的移植后结果相差无几。不仅如此，常温机械灌注可以为供肝提供氧气与营养物质，将肝脏在体外的保存时间最高延长至1周。这为体外干预治疗DCD供肝的热缺血时间所造成的IRI提供了充分的时间与平台。

目前，特异性针对DCD边缘供肝在体外常温机械灌注灌注液的研究尚无报道，因此研制一款针对性改善DCD边缘供肝的灌注液配方，对于DCD肝脏移植技术的发展和推广，具有十分重要的意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于改善大鼠DCD供肝的常温机械灌注液，本发明提供的灌注液对大鼠DCD供肝有显著的改善作用。

本发明提供了一种用于改善大鼠DCD供肝的常温机械灌注液，包括L-抗坏血酸、葡萄糖、肝素、胰岛素、L-谷氨酰胺、抗生素和William’s mediumE培养基。

优选的，所述L-抗坏血酸在灌注液中的含量为1～10mmol/L。

优选的，所述L-抗坏血酸在灌注液中的含量为5mmol/L。

优选的，所述葡萄糖在灌注液中的含量为5～20mmol/L。

优选的，所述肝素在灌注液中的含量为1～10U/mL。

优选的，所述胰岛素在灌注液中的含量为0.2～2U/mL。

优选的，所述L-谷氨酰胺在灌注液中的含量为1～10mmol/L。