[发明专利]一种核酸提取芯片及采用其快速提取血液DNA的方法

说明书

本发明公开一种核酸提取芯片，主要由圆盘形本体以及围绕其中心环形排列的若干个离心通道组成，每个离心通道靠近所述圆盘形本体中心的一端设有包埋有核酸提取液的加样区A，另一端设有取样区B；所述离心通道的中部设有过滤膜，位于所述过滤膜与加样区A之间还设有仅允许液体从加样区A流向取样区B的单向阀；本发明还提供一种采用其快速提取血液DNA的方法，采用的核酸提取芯片，事先在芯片中预埋有核酸提取液，可快速得到纯度较高的核酸。

技术领域

本发明涉及核酸提取技术领域，具体讲是一种核酸提取芯片及采用其快速提取血液DNA的方法。

背景技术

核酸检测由于其灵敏度高、特异性强、操作简便、所需时间短等特点，已广泛应用于临床医学、检验检疫等多个领域，尤其是PCR、等温扩增等核酸扩增技术。然而，核酸扩增技术对于临床或直接获得的标本中的干扰物质较为敏感，会造成检测结果的假阴性，故在核酸扩增前需进行样品核酸提取与纯化。但一直以来，样本中核酸的提取和纯化是整个实验中最耗时，最繁琐的过程，严重影响样本检测的速度以及现场应用。

样本中核酸的提取主要包括两个步骤：裂解细胞和提取核酸。裂解细胞使核酸从细胞中释放，蛋白解离的常用方法包括物理法(煮沸、冻融、微波、超声、研磨等)、化学方法(高盐、表面活性剂、苯酚等)和酶消化法(溶菌酶、蛋白酶K等)。

现有的核酸的提取方法中，苯酚-氯仿抽提法、异丙醇沉淀法及甲酰胺裂解法是提取DNA最为经典的方法，目前很多方法的改进都是在这些方法的基础上进行的，这三种方法均是利用蛋白酶K和十二烷基硫酸钠(SDS)消化裂解细胞。在前两种方法中，裂解液先用苯酚-氯仿去除蛋白质，再分别用乙醇或异丙醇双醇沉淀DNA。甲酰胺法是利用高浓度的甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，然后利用透析来处理DNA样品。这些经典方法在不计样本量情况下获得的DNA纯度很高，能够满足各种试验的要求，但操作繁琐，用时长，且所用试剂具有一定的毒性。

碱裂解法是在NaOH提供的高pH(12.0-12.6)条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁，裂解细胞，与NaOH共同使细胞的蛋白质发生变性，释放出DNA。裂解后，细胞壁碎片与变性的蛋白质和其他杂质形成大的复合物，这些复合物在高钾盐条件下，可有效沉淀，而DNA保留于上清液中，再通过无水乙醇沉淀、乙醇洗涤等步骤纯化DNA。碱裂解法虽然快速简便，但去蛋白效果欠佳，明显影响了后续PCR效果。

磁珠法是近几年才发展起来的核酸提取方法，磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞，从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后，再在磁场作用下，使磁性颗粒与液体分开，回收颗粒(即磁珠-DNA混合物)，再用洗脱液洗脱，得到纯净的DNA。由于其系列试剂不含氯仿、苯酚等毒性大的有机溶剂，提取步骤更简单，对核酸样本的回收率高和纯度好等优势而倍受研究者青睐。不过产品基本上为国外所垄断，价格非常昂贵，成本较高，从而限制了其在我国的广泛应用。

综上所述，传统的提取方式存在过程耗时长，成本高，步骤繁多，增加了污染的风险，对基层的操作人员来讲，难度较大，可能无法非常准确的完成提取，因此，需要一种快速提取DNA的试剂，简单处理一下就可以作为模板进行上机检测，满足科研和检验领域快速检测的需求。

发明内容

本发明提供一种核酸提取芯片及采用其快速提取血液DNA的方法，采用的核酸提取芯片，事先在芯片中预埋有核酸提取液，可快速得到纯度较高的核酸。

本发明的技术解决方案如下：一种核酸提取芯片，主要由圆盘形本体以及围绕其中心环形排列的若干个离心通道组成，每个离心通道靠近所述圆盘形本体中心的一端设有包埋有核酸提取液的加样区A，另一端设有取样区B；所述离心通道的中部设有过滤膜，位于所述过滤膜与加样区A之间还设有仅允许液体从加样区A流向取样区B的单向阀。

所述单向阀由2个端部相互紧贴的楔形瓣膜组成。

所述加样区A和取样区B上还设有端盖。