[发明专利]一种铁皮石斛中有效成分的分离方法

说明书

本发明涉及天然药物的分离富集领域，尤其是涉及一种铁皮石斛中有效成分的分离方法，包括如下步骤：（1）将铁皮石斛原料经粉碎机粉碎并过筛后得到石斛粉末；（2）称取C₁₈分散剂对石斛粉末进行基质固相分散提取；（3）经洗脱、离心取上清后，进样至串联的超临界色谱柱与质谱柱中并分析表征其提取效果。本发明可以方便快捷地同时从石斛中分离提取多达7种有效成分，并且灵敏度与准确度高，重现性好；并且一次上样即可实现多种物质同时提取，有机溶剂消耗少、提取时间短、环境污染小、富集效率高。

技术领域

本发明涉及天然药物的分离富集领域，尤其是涉及一种铁皮石斛中有效成分的分离方法。

背景技术

石斛作为一种珍贵的药用植物，被收录在中国药典(2015年版)中。石斛属植物是一种重要的滋补品和功能性食品，属于兰科植物中的多年生草本植物.。自然界石斛有许多不同种类，包括金钗石斛，鼓槌石斛和铁皮石斛等。在中国，浙江，云南和安徽省是石斛的主要产地。石斛具有滋阴，清热，改善胃部不适，促进体液产生和改善视力的功效，其中主要药效物质含有多种活性成分，例如多糖、黄酮、生物碱、芪类、氨基酸、菲类、联苄和酚类等。类黄酮具有广泛的生化和药理特性，已被用作抗氧化剂，消炎，免疫抑制，抗肿瘤，细胞毒性等，其中反相液相色谱由于易于操作，高分辨率和准确性等被用于分离石斛中芹菜素，木犀草素等黄酮类化合物。石斛中的酚类化合物(联苄类和菲类)被列为石斛属的优良化学标记物，除了具有抗癌，抗衰老，抗痉挛和抗炎症的功效外，它们还具有其各自特定的药理作用。联苄类化合物石斛酚对糖尿病性白内障有治疗作用，毛兰素也具有改善糖尿病带来的视网膜病变的作用。此外，柚皮素(菲类化合物)对胰岛素分泌和肝葡萄糖产生有调节功能从而能抵抗糖尿病。考虑到这些活性成分的重要功效，因此探讨石斛中这些活性物质的最佳提取方法是非常有价值的。然而，传统的提取方法有很多局限，消耗大量有机溶剂，需要较长的提取时间，环境污染严重且不能富集等。因此，开发了一种简单，快速，且环保的分析方法非常重要。

例如公开号为CN1435404的“一种从石斛中提取毛兰素的方法”，包括应用超临界CO2萃取和柱层析法以无水乙醇、甲醇、丙酮等为夹带剂，以CO2等为提取介质从兰科植物石斛中提取抗肿瘤成分毛兰素；对所得的粗提物再以石油醚：醋酸乙酯溶液为洗脱剂进行硅胶柱柱层析分离及重结晶等步骤获得精提物，达到供人体注射用的标准。该方法可以方便快速地从石斛中提取毛兰素，但是只能提取石斛中的毛兰素，而对于石斛中其他的有效成分、尤其是石斛中不同极性的成分并不能很好地分离，石斛的分离效率较低，

发明内容

本发明是为了克服现有技术无法同时分离出石斛中多种不同极性的有效成分的缺点，提供一种铁皮石斛中有效成分的分离方法，可以方便快速地从石斛中同时提取出多种不同极性的有效成分。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种铁皮石斛中有效成分的分离方法，包括如下步骤：

(1)将铁皮石斛原料经粉碎机粉碎并过筛后得到石斛粉末；

(2)称取C₁₈分散剂对石斛粉末进行基质固相分散提取；

(3)经洗脱、离心取上清后，进样至串联的超临界色谱柱与质谱柱中并分析表征其提取效果。

石斛的提取方法有多种，传统的提取方法有很多局限，比如难以同时提取出多种有效成分、消耗大量有机溶剂、需要较长的提取时间、环境污染严重且不能富集等，而目前也有部分利用实验室中的色谱柱或是质谱等提取石斛的新方法，但是这些方法仍然不能实现，或是只能实现两、三种有效成分的同时提取，而对于石斛中更多的不同极性成分，至今仍然没有一个非常方便快捷并且能够同时提取的方法。