[发明专利]Z-VAD-FMK在制备人类1型单纯疱疹病毒抑制剂中的应用

说明书

本发明提供了一种Z‑VAD‑FMK在制备人类1型单纯疱疹病毒抑制剂中的应用。该发明通过Z‑VAD‑FMK抑制细胞凋亡，而无论在细胞还是动物水平，细胞凋亡都能抑制不同方式激发的NF‑κB及IFN‑1信号通路，使得人类1型单纯疱疹病毒引起的天然免疫反应被细胞凋亡所负调控，从而实现通过Z‑VAD‑FMK增强人类1型单纯疱疹病毒激发的天然免疫通路，起到有效抗病毒作用的目的。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种Z-VAD-FMK在制备人类1型单纯疱疹病毒抑制剂中的应用。

背景技术

疱疹病毒(Herpes virus)是一大类有包囊dsDNA病毒，根据其生物学特性，归类为疱疹病毒科(Herpesviridae)。目前共发现100多种疱疹病毒，单纯疱疹病毒(Herpessimplex virus，HSV)是疱疹病毒的典型代表，主要侵害皮肤、黏膜以及神经组织，严重影响人类的生命健康。

HSV属于甲型疱疹病毒亚科(Alphaherpesvirinae)单纯疱疹病毒属(Simplexvirus)，HSV病毒根据抗原性的不同可分为：1型人类单纯疱疹病毒(HSV-1)和2型人类单纯疱疹病毒(HSV-2)。HSV-1主要感染粘膜上皮细胞，并在感觉神经元中建立终身感染，HSV-1感染最常见的症状为口腔颌面部形成疼痛的水泡状病变。在我国一般人群中，超过80％已经潜伏感染了HSV-1，在老年和免疫功能低下的人群中，HSV-1感染可导致严重疾病，如疱疹性脑炎和角膜炎，甚至引起的失明。HSV-1已成为影响人民生命健康的重要因素，目前并没有针对HSV-1的有效疫苗和药物。

细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种主要表现形式，其对多细胞生物的发育及维持内部环境稳定至关重要，同时也被认为参与多种抗病毒天然免疫通路。细胞凋亡以依赖于一类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspases)的形式通过外源或内源途径激活。外源性途径需要外部刺激来激活死亡受体，如肿瘤坏死因子(TNF)受体1(TNFR1)、TRAIL受体1(TRAILR1)、TRAILR2和FAS，从而激活Caspases-8和-10，随后激活效应Caspases-3和-7。细胞应激(如DNA损伤、内质网应激和细胞因子剥夺)激活内源性(或线粒体)途径，从而增加线粒体外膜通透性(MOMP)，在MOMP作用后，细胞色素c从线粒体释放到细胞质中，诱导凋亡体的形成和Caspase-9的激活，从而激活效应Caspases-3和-7。

Z-VAD-FMK是研究细胞凋亡的一种关键化合物，是一种细胞渗透性的，不可逆泛caspase抑制剂，能以不可逆的形式与活化的Caspases结合从而阻断细胞凋亡。目前已有大量细胞内研究证明了Z-VAD-FMK抑制细胞凋亡的作用，如在THP.1和JurkatT细胞中阻断细胞凋亡、在S2细胞中将转染细胞的生存百分数从26％提高到63％、在人类嗜中性粒细胞中较低浓度(1-30μM)时完全抑制TNFα刺激的细胞凋亡、在早期角膜基质细胞中抑制细胞凋亡等。

而天然免疫通路与细胞凋亡之间存在着复杂的互作网络，如NF-κB可抑制TNF诱导的细胞凋亡，并诱导凋亡抑制蛋白的表达，I型干扰素(IFN-I)及IRF3可诱导TRAILR1、TRAILR1、Caspases-8等多种促凋亡蛋白表达。因此，本发明研究一种新型的抗人类1型单纯疱疹病毒的治疗药物，来增强天然免疫通路从而达到抗病毒的目的。

发明内容

本发明的目的是开发一种人类1型单纯疱疹病毒抑制剂，来增强人类1型单纯疱疹病毒激发的天然免疫通路，从而起到有效抗病毒的作用。

为此，本发明提供了一种Z-VAD-FMK在制备人类1型单纯疱疹病毒抑制剂中的应用。

进一步的，所述Z-VAD-FMK通过抑制细胞凋亡对天然免疫通路负调控而抑制人类1型单纯疱疹病毒的表达和复制。

进一步的，所述Z-VAD-FMK抑制人类1型单纯疱疹病毒活性浓度为25～400μM。