[发明专利]化妆品中四种胜肽的高效液相色谱串联质谱检测方法

权利要求书

1.化妆品中四种胜肽的高效液相色谱串联质谱检测方法，所述四种胜肽为L-肌肽、谷胱甘肽、乙酰基四肽-5和乙酰基六肽-8，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，化妆品样品前处理

称取化妆品样品置于洁净的离心管中，加水溶解、混匀、涡旋、离心，取上清液适量，过滤膜，所得滤液为样品工作液；

步骤二，系列混合标准溶液配制

分别精密称取L-肌肽、谷胱甘肽、乙酰基四肽-5和乙酰基六肽-8标准品，用水溶解，配制所述L-肌肽、谷胱甘肽、乙酰基四肽-5和乙酰基六肽-8浓度均为1.00µg/mL的混合标准溶液；

分别精密量取所述混合标准溶液，加水稀释，配制所述L-肌肽、谷胱甘肽、乙酰基四肽-5和乙酰基六肽-8浓度均为1.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、50.0ng/mL、200ng/mL的系列混合标准溶液；

步骤三，高效液相色谱串联质谱检测

将所述系列混合标准溶液和样品工作液分别注入高效液相色谱串联质谱仪中，进行检测分析；

其中，液相色谱条件为：

色谱柱：C18柱，4.6mm×100mm，2.7μm；柱温：24-26℃；流速：0.3-0.6mL/min；进样量：5-10μL；流动相A为水，含有0.1%v/v乙酸，流动相B为乙腈；等度洗脱12min，流动相A和流动相B的体积比为90:10；

质谱条件为：

离子源：AJS ESI；毛细管电压：3400-3600 V；裂解电压：370-390V；气帘气温度：250℃；气帘气流速：11L/min；雾化器压力：20psi；鞘气温度：250℃；鞘气流速：14L/min；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应离子监测模式MRM。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，所述L-肌肽、谷胱甘肽、乙酰基四肽-5和乙酰基六肽-8的MRM优化参数为：

电离方式 定量离子对 碰撞能量(V) 定性离子对 碰撞能量(V)

肌肽 ESI+ 227.1/156.1 14 227.1/110.2 26

谷胱甘肽 ESI+ 308.0/178.9 10 308.0/76.0 34

乙酰基四肽-5 ESI+ 493.1/110.1 46 493.1/338 20

乙酰基六肽-8 ESI+ 445.3/102.0 34 445.3/572.3 22 。

3.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，步骤一中，所述离心是以12000 r/min离心10min。

4.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，步骤一中，所述滤膜为0.22μm滤膜。