[发明专利]一种小组织块脱水方法在审
申请号: | 202010724425.2 | 申请日: | 2020-07-24 |
公开(公告)号: | CN111896353A | 公开(公告)日: | 2020-11-06 |
发明(设计)人: | 吴圆圆 | 申请(专利权)人: | 南通大学 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N1/44;G01N1/36;G01N1/28 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 钱超 |
地址: | 226019 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织 脱水 方法 | ||
1.一种小组织块脱水方法,其特征在于步骤为:
第一步,配置IMS:由95% 乙醇加入5%甲醇后发生甲基化变性制成工业甲基化乙醇Industrial Methylated Spirits,IMS;
第二步,小块组织脱水: 99%IMS I 道,99%IMS II 道,99%IMS III 道,每道中组织浸没1 h;
第三步:二甲苯组织透明、浸蜡、包埋、切片、烤片、烘片以及苏木素、伊红染色。
2.根据权利要求1所述的一种小组织块脱水方法,其特征在于:所述二甲苯组织透明具体步骤为:二甲苯I 道15分钟,二甲苯II 道15分钟。
3.根据权利要求1所述的一种小组织块脱水方法,其特征在于:所述浸蜡具体步骤为:石蜡I 道30分钟,石蜡II 道30分钟,石蜡III道30分钟。
4.根据权利要求1所述的一种小组织块脱水方法,其特征在于:所述包埋具体步骤为:使用自动包埋机,将组织块切面朝下放置于金属框凹槽中,出蜡包埋住组织块,上方放入包埋盒,继续出蜡直至与包埋盒上方平齐,将金属框及包埋盒一起移至冷冻台,组织块完全凝固后移除金属框,包埋结束。
5.根据权利要求1所述的一种小组织块脱水方法,其特征在于:所述切片具体步骤为:将包埋后的组织石蜡块置于包埋机上,先使用粗调约20微米厚度修片,组织块暴露后,调节切片厚度为4微米,继续切片,使用镊子轻轻夹取切片的石蜡边缘,放置于42度水浴锅中展片,在将载玻片伸入水面以下并靠近组织切片后慢慢使其贴附于玻片。
6.根据权利要求1所述的一种小组织块脱水方法,其特征在于:所述烤片具体步骤为:将以上贴附组织切片的载玻片置于烤片机,60度烤片1小时。
7.根据权利要求1所述的一种小组织块脱水方法,其特征在于:所述烘片具体步骤为:将烤后切片置于56度烘箱12小时。
8.根据权利要求1所述的一种小组织块脱水方法,其特征在于:所述苏木素、伊红染色具体步骤为:将石蜡切片依次放置于二甲苯I道、二甲苯II 道中脱蜡,各10分钟,然后依次浸入100%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇,各为1分钟, 流水冲洗玻片1分钟,过蒸馏水后于苏木素染液染色5分钟, 苏木素染色细胞核为蓝色,流水冲洗1分钟后置于1%盐酸酒精分化数秒, 迅速入水冲洗,饱和碳酸锂蓝化1-60秒, 流水冲洗1分钟,于80%乙醇1-60秒至细胞核返蓝,置伊红染色液1分钟,伊红染色细胞浆为粉红色,依次经95%乙醇I道、95%乙醇II 道、无水乙醇I道、无水乙醇II 道、无水乙醇III道和无水乙醇道脱水数秒,放入二甲苯中浸泡, 封片:擦去切片周围多余的二甲苯,勿使切片干涸,快速滴加适量中性树胶,加盖玻片封固。
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