[发明专利]用于治疗关节损坏的肽和组合物

说明书

本发明提供新的蛋白酶抗性多肽、以及用于治疗、改善或预防关节损坏相关病症，包括急性关节损伤和关节炎，的组合物和方法。

本申请是申请日为2014年3月7日的、发明名称为“用于治疗关节损坏的肽和组合物”的中国专利申请201480012768.9(PCT/US2014/022102)的分案申请。

相关申请

本申请要求2013年3月8日递交的美国临时专利申请号61/775,400和2014年2月10日递交的美国临时专利申请号61/938,123的优先权和权益，所有这些文献均完整地特此并入作为参考。

发明背景

骨关节炎(OA)是最常见的肌肉骨骼紊乱。大约4千万美国人目前患有OA；预计该数目在接下来的20年里会由于群体老龄化和寿命的增加而增加到6千万，从而导致OA成为第四大致残原因。OA的特征在于，缓慢的关节退行性破坏，包括关节软骨(含有为关节提供润滑和缓冲的细胞和基质)和位于关节软骨下方的软骨下骨。OA可以被认为是各种病因学因素的后果。例如，它可以由关节软骨或骨的异常生物机械压力或遗传性或获得性异常而引起。目前OA治疗包括使用口服NSAID或选择性环加氧酶2(COX-2)抑制剂缓解疼痛、关节内(IA)注射活性剂例如皮质类固醇和透明质酸、以及手术方法。

关节损坏例如急性关节损伤，例如半月板或韧带撕裂、或关节内骨折，也可以导致关节炎，例如创伤后关节炎。由于关节软骨具有有限的修复能力，甚至小的不可检测的损伤也常常可能随时间而恶化并导致OA。目前关节损伤的治疗可以包括手术和聚焦于使受伤关节再生的其它侵入性方法，以及用活性剂治疗以减少疼痛和炎症。

间充质干细胞(MSCs)存在于成年关节软骨中，分离后可以在体外程序化以分化为软骨和其它间充质细胞谱系，并可以用于软骨再生。部分地，该过程受生长因子(TGFβs,BMPs)、血清条件和细胞-细胞接触的调节。WO2011/008773描述肽组合物及其用于治疗或预防关节炎和关节损伤的用途和用于诱导间充质细胞分化为软骨细胞的用途。此外，WO2011/008773描述小分子化合物、组合物及其用于改善关节炎和关节损伤的用途和用于诱导间充质细胞分化为软骨细胞的用途。

尽管手术技术和再生技术已经在软骨恢复、延缓退化和改善关节损坏的修复上取得了一些进展，但是仍持续需要用于有效软骨再生、治疗关节损坏、和改善或防止OA的改良组合物和方法。

发明概述

本发明涉及鉴定新的血管生成素样3(ANGPTL3)多肽和蛋白质变体，所述变体具有改善的药物性质，例如比野生型ANGPTL3更稳定、更不易于发生蛋白水解和酶促降解。本发明还提供在哺乳动物中用于治疗关节损坏或关节损伤的组合物和方法、和改善或预防关节炎、关节损坏或关节损伤的方法。

因此，本发明提供蛋白酶抗性多肽，其包含与选自表1序列之任一或多个的氨基酸序列具有至少95％氨基酸序列同一性、或至少96％,97％,98％,99％或100％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，如本文进一步描述。表1的修饰多肽在位置423包括非K或R的极性氨基酸，其中所述位置参照全长ANGPTL3多肽序列SEQ ID NO：1确定。一些实施方案中，参照SEQID NO：1确定的位置423的氨基酸是Q或S。一些实施方案中，参照SEQ ID NO：1确定的位置423的氨基酸是Q。一些实施方案中，参照SEQ ID NO：1确定的位置423的氨基酸是S。一些实施方案中，参照SEQ ID NO：1确定的位置423的氨基酸缺失。此外，提供的多肽具有软骨发生活性。