[发明专利]一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置及其使用方法

权利要求书

1.一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置，其特征是，包括：恒流泵、第一切换阀、第一凝集素柱、第二凝集素柱、第二切换阀和馏分收集器，

所述恒流泵的出口端通过第一管路连接第一切换阀的1号位，所述第一切换阀的2号位通过第二管路与所述第一凝集素柱的进口端连接，所述第一切换阀的3号位通过第五管路与所述第二凝集素柱的进口端连接，所述第一切换阀的4号位通过第七管路与所述馏分收集器的进口端连接，所述第一凝集素柱的出口端通过第三管路与所述第二切换阀的1号位连接，所述第二凝集素柱的出口端通过第六管路与所述第二切换阀的2号位连接，所述第二切换阀的3号位通过第四管路与所述馏分收集器的进口端连接。

2.一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置的使用方法，包括步骤：

(1)串联凝集素亲和柱：准备如权利要求1所述一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置；

(2)海参粗多糖处理及上样：将海参粗多糖粗品溶于缓冲液体系中，获得海参粗多糖样品，所述第一凝集素柱和第二凝集素柱处于串联状态，所述海参粗多糖样品经所述恒流泵上样后，通过第一管路进入所述第一切换阀的1号位，再从所述第一切换阀的2号位经第二管路到达第一凝集素柱，所述海参粗多糖样品中的海参岩藻聚糖组份被吸附保留于所述第一凝集素柱，所述海参粗多糖样品从第三管路流入第二切换阀的1号位，再从第二切换阀的2号位经第六管路到达第二凝集素柱，所述海参粗多糖样品中的海参糖胺聚糖组份被吸附并保留于所述第二凝集素柱，所述海参粗多糖样品通过第五管路进入所述第一切换阀的3号位，再从第一切换阀的4号位通过第七管路到达馏分收集器的废液瓶，重复本步骤，除去未能有效结合的多糖和其他物质；

(3)海参岩藻聚糖的纯化；打开恒流泵输送NaCl，所述NaCl通过第一管路进入所述第一切换阀的1号位，再从所述第一切换阀的2号位通过第二管路进入所述第一凝集素柱，所述NaCl洗脱所述第一凝集素柱，将洗脱下来的海参岩藻聚糖通过第三管路进入第二切换阀的1号位，再从第二切换阀的3号位经第四管路到达所述馏分收集器的一号样品瓶中，即得到纯化的海参岩藻聚糖馏分；

(4)海参糖胺聚糖的纯化；打开恒流泵输送NaCl，所述NaCl通过第一管路进入所述第一切换阀的1号位，再从第一切换阀的3号位通过第五管路进入所述第二凝集素柱，所述NaCl洗脱所述第二凝集素柱，将洗脱下来的海参糖胺聚糖通过第6管路进入所述第二切换阀的2号位，再从所述第二切换阀的3号位经第四管路到达所述馏分收集器的二号样品瓶中，即得到纯化的海参糖胺聚糖馏分；

(5)脱盐：对一号样品瓶中的纯化的海参岩藻聚糖馏分、二号样品瓶中的纯化的海参糖胺聚糖馏分采用葡聚糖凝胶色谱柱G100进行脱盐；

(6)冻干：用冷冻干燥机对一号样品瓶中的纯化的海参岩藻聚糖馏分、二号样品瓶中的纯化的海参糖胺聚糖馏分进行浓缩冻干。

3.如权利要求2所述的一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置的使用方法，其特征是：步骤(1)中所述第一凝集素柱为荆豆凝集素亲和柱、大豆凝集素亲和柱、麦胚凝集素亲和柱中的任意一种，所述第二凝集素柱为荆豆凝集素亲和柱、大豆凝集素亲和柱、麦胚凝集素亲和柱中的任意一种。

4.如权利要求2所述的一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置的使用方法，其特征是：步骤(2)中所述缓冲液体系中的缓冲液为纯水、TRIS-HCL缓冲液、磷酸缓冲液、醋酸铵缓冲液中的任意一种。

5.如权利要求2所述的一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置的使用方法，其特征是：步骤(2)中所述海参粗多糖样品的浓度为10mg/mL，pH为5.0。

6.如权利要求2所述的一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置的使用方法，其特征是：步骤(2)中所述上样体积为第一凝集素柱体积的0.2～10倍。

7.如权利要求2所述的一种串联凝集素亲和柱纯化海参多糖装置的使用方法，其特征是：步骤(2)的重复次数为3-5次。