[发明专利]SlMS基因在调控番茄育性中的应用及方法在审
| 申请号： | 202010695196.6 | 申请日： | 2020-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN112011546A | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 欧阳波;高虎;周玉红;陈蓉;卢永恩;叶志彪 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/82;C07K14/415;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司： | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人： | 严超 |
| 地址： | 430000 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | slms 基因 调控 番茄 中的 应用 方法 | ||
1.SlMS基因在调控番茄育性中的应用，所述SlMS基因的CDS序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SlMS基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SlMS基因编码的蛋白：
(1)氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的同源结构域指蛋白；
(2)序列如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列中经过取代、缺失、添加一个或若干氨基酸残基所得到的衍生蛋白。
4.根据权利要求1至3任一项所述的应用，其特征在于，所述调控番茄育性的方法是采用敲除或者沉默CDS序列如SEQ ID NO.2所示的SlMS基因或者核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的SlMS基因。
5.一种创建雄性不育番茄的方法，其特征在于，利用CRISPR/Cas9系统编辑番茄SlMS基因使所述SlMS基因丧失或改变功能，所述SlMS基因的CDS序列如SEQ ID NO.2所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
6.根据权利要求5所述的创建雄性不育番茄的方法，其特征在于，所述CRISPR/Cas9系统包含2个gRNA，序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。
7.根据权利要求6所述的创建雄性不育番茄的方法，其特征在于，包括如下步骤：
构建CRISPR/Cas9载体pCP098M-SlMS；
利用农杆菌介导番茄遗传转化，获得SlMS基因功能丧失或改变的编辑植株。
8.根据权利要求7所述的创建雄性不育番茄的方法，其特征在于，构建CRISPR/Cas9载体pCP098M-SlMS所采用的引物序列分别如SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7所示。
9.根据权利要求7所述的创建雄性不育番茄的方法，其特征在于，鉴定所述编辑植株所采用的引物序列分别如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示。
10.根据权利要求7所述的创建雄性不育番茄的方法，其特征在于，编辑位点检测引物序列分别如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示。
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