[发明专利]一种金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶及其制备方法和应用在审
| 申请号: | 202010691524.5 | 申请日: | 2020-07-17 |
| 公开(公告)号: | CN111808837A | 公开(公告)日: | 2020-10-23 |
| 发明(设计)人: | 潘强;任慧英;王佳;孙虎芝 | 申请(专利权)人: | 青岛诺安百特生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/11;C12Q1/527;A61K38/51;A61P31/04;C12R1/19 |
| 代理公司: | 青岛鼎丞智佳知识产权代理事务所(普通合伙) 37277 | 代理人: | 韩耀朋;曲志乾 |
| 地址: | 266109 山东省青岛*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 金黄色 葡萄球菌 噬菌体 裂解 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2,其特征在于,其具有如Seq ID NO.1所示的氨基酸序列;或其具有与Seq ID NO.1所示的氨基酸序列至少95%的同源性且具有基本相同酶活的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2,其特征在于,所述裂解酶LysSA2来源于金黄色葡萄球菌噬菌体。
3.根据权利要求1或2所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2,其特征在于,所述金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2的结构域包括N端的CHAP水解结构域、中间的Amidase_2水解结构域和C端的SH3_5结合结构域。
4.如权利要求1所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2的编码基因,其特征在于,其具有如Seq ID NO.2所示的核苷酸序列,或具有与Seq ID NO.2所示的序列至少95%的同源性且能表达基本相同酶活的裂解酶的核苷酸序列。
5.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体由表达载体和如权利要求4所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2的编码基因重组而成。
6.一种重组工程菌,其特征在于,所述重组工程菌是向宿主菌中转化如权利要求5所述的重组表达载体而成。
7.一种权利要求1所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)将权利要求3所述的裂解酶LysSA2的核苷酸序列克隆到表达载体中,得到重组表达载体;
(2)将步骤1得到的重组表达载体转入大肠杆菌感受态细胞,得到重组工程菌;
(3)利用重组工程菌诱导表达裂解酶LysSA2;
(4)提取纯化步骤3得到的裂解酶LysSA2。
8.根据权利要求7所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2的制备方法,其特征在于,所述表达载体为pCold TF。
9.根据权利要求7所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2的制备方法,其特征在于,所述大肠杆菌感受态细胞为大肠杆菌DH5α或大肠杆菌BL21。
10.一种权利要求1所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2在制备预防或治疗葡萄球菌病的药物或抑菌剂中的应用;优选的,所述葡萄球菌病为金黄色葡萄球菌感染导致的疾病。
11.一种检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1或2所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2。
12.一对用于扩增如权利要求1或2所述的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysSA2的编码基因的特异性引物,其特征在于,为序列表Seq ID NO.3所述的引物LysSA2-F和Seq IDNO.4所述的引物LysSA2-R。
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