[发明专利]用于核酸检测的分子探针及其制备方法和用途

说明书

本文涉及用于核酸检测的分子探针及其制备方法和用途。具体地，本文公开了一种用于核酸检测的分子探针，其包含：(1)分子探针载体，其包含细胞穿膜肽和与之相连的可检测标记物，和(2)靶向性寡核苷酸，其中，所述分子探针载体连接至所述靶向性寡核苷酸。本文还提供一种用于制备所述分子探针的方法，核酸检测方法，以及用于核酸检测的试剂盒。

技术领域

本发明属于分子生物检测领域，具体涉及一种用于体内或体外核酸检测的寡核苷酸分子探针，及其制备方法和用途。

背景技术

核酸检测技术广泛应用于医学诊断、食品安全和环境监测等领域。该技术以例如病原或病症源性靶核酸为研究对象，通过鉴定靶核酸的存在或检测靶核酸的水平，来证实病原或病症(例如，病原性生物体、疾病细胞或组织等)的存在。

目前已有的核酸检测方法包括核酸印迹、微阵列、核酸扩增技术(例如，RT-PCR、RT-LAMP、SAT)等。然而，这些方法需对样品进行核酸提取、扩增和检测，其中涉及繁琐的操作步骤和昂贵的仪器及材料，从而检测成本高、费时耗力；此外，操作中对于条件和试剂的选用以及操作人员的操作差异也可能对样品核酸产生干扰，致其损失或被遮蔽，导致部分样品不能被正常检出，易产生假阴性结果。

用于原位杂交的核酸探针被越来越多地用于细胞内外生物化学物质的检测。在细胞或组织结构保持不变的情况下，使带标记的核苷酸片段，基于碱基配对原则，与待测细胞或组织中相应的靶核酸特异性结合(例如，杂交)，并通过光学方法或成像技术标识出来，以实现对靶核酸的检测(例如，可视化定位和/或定量)。常用于此类检测的探针包括用放射性核素或荧光标记的探针。然而，这些探针在检测精确性、安全性方面仍有限制。

基于以上，仍继续需要一种新型分子探针，其制备便捷，且能够提供安全、准确的核酸检测。

发明内容

在本发明的一个方面中，提供一种用于核酸检测的分子探针，其包含：

(1)分子探针载体，其包含细胞穿膜肽和与之相连的可检测标记物，和

(2)靶向性寡核苷酸，

其中，所述分子探针载体连接至所述靶向性寡核苷酸。

在本发明的另一个方面中，提供一种用于制备分子探针的方法，其包括：

使可检测标记物与细胞穿膜肽连接，以获得分子探针载体；和

使所述分子探针载体与靶向性寡核苷酸孵育足以允许所述分子探针载体与所述靶向性寡核苷酸之间发生连接的时间，以获得所述分子探针。

在本发明的另一个方面中，提供一种用于核酸检测的方法，其包括：

向对象或来自对象的样品给予根据本文所述的分子探针；和

通过检测所述对象或来自对象的样品中的可检测标记物来确定靶核酸的存在和/或水平。

在本发明的另一个方面中，提供一种用于核酸检测的试剂盒，其包含：

含有根据本文所述的分子探针载体的容器；

含有根据本文所述的靶向性寡核苷酸的容器；和

任选的，使用说明。

我们发现，本文所述的分子探针能够由分子探针载体(也即，可检测标记物与细胞穿膜肽的连接物)与靶向性寡核苷酸通过一步法制备获得。相对于现有的多步骤探针合成方法，本文所述的分子探针制备方法简单、高效、对原材料利用率高且产废少，且所制备的探针能够提供安全、准确的核酸检测。

附图说明

下面结合附图对本发明作进一步说明。所提供的附图及说明仅为图示说明本发明的实施方案，而不意在局限本发明的范围。