[发明专利]含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂及其制备方法

权利要求书

1.含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、将凝结芽孢杆菌菌种在斜面培养基中进行活化；

S2、将活化后的凝结芽孢杆菌菌种以1％接种量转接入种子培养基中，得到一级种子液；

S3、将一级种子液以1％接种量转接入种子培养基中，得到二级种子液；

S4、将二级种子液以5％接种量转接入液体发酵培养基中进行发酵；

S5、发酵结束后，加入木聚糖酶，添加量为0.5％～1.0％；

S6、将酶解液喷雾干燥，得到粉末状含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌制剂。

2.根据权利要求1所述的含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：

所述木聚糖酶为β-1,4-木聚糖内切酶。

3.根据权利要求1或2所述的含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：

在S6中，酶解在发酵罐内进行，酶解搅拌转速为75rpm/min～100rpm/min，木聚糖酶的酶活量为3000U/g，在35℃～45℃温度下，所述酶解液调节至pH5.0～6.0，搅拌酶解8h～12h。

4.根据权利要求1或2所述的含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法中，其特征在于：

在S1中，从-80℃冷冻保存的甘油管中取液体菌种，划线至斜面培养基中进行活化，在40℃下培养24h～48h；

所述斜面培养基包括葡萄糖2g/L，蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，氯化钠5g/L，琼脂15g/L，pH为7.0，所述斜面培养基在121℃下灭菌20min。

5.根据权利要求1或2所述的含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：

在S2中，将活化后的斜面种子转接入转有种子培养基的容器中，在转速为180rpm/min～220rpm/min下，培养18h～24h；

所述种子培养基包括葡萄糖30g/L，蛋白胨10g/L，酵母膏10g/L，氯化钠5g/L，硫酸镁0.5g/L，碳酸钙10g/L，pH为7.2～7.4，种子培养基在121℃下灭菌20min。

6.根据权利要求1或2所述的含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：

在S3中，采用发酵罐进行二级种子的培养，发酵罐内装有种子培养基，一级种子在发酵罐内在40℃下，溶氧20％～30％，转速200rpm/min～500rpm/min，通气量为1：1vvm，罐压控制0.04MPa～0.06MPa，培养时间为18h～24h；

所述种子培养基包括葡萄糖30g/L，蛋白胨10g/L，酵母膏10g/L，氯化钠5g/L，硫酸镁0.5g/L，碳酸钙10g/L，pH为7.2～7.4，种子培养基在121℃下灭菌20min。

7.根据权利要求1或2所述的含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：

在S4中，发酵过程在发酵罐中进行，发酵罐的装填系数为70％，二级种子在所述发酵罐内在40℃，溶氧20％～30％，转速100rpm/min～400rpm/min，通气量1：(0.75～1)vvm，罐压控制0.04MPa～0.06MPa，培养时间为36h～48h；

液体发酵培养基包括葡萄糖10g/L～30g/L，可溶性淀粉5g/L～15g/L豆粕，2.5g/L～7.5g/L，蛋白胨5g/L～10g/L，酵母膏5g/L～10g/L，氯化钠5g/L，硫酸镁1.0g/L，磷酸二氢钾2.0g/L，碳酸钙10g/L，麦麸10g/L～50g/L，消泡剂0.05％，其中麦麸的粒径为60目～80目，液体发酵培养基的pH为7.2～7.4，121℃灭菌30min。

8.根据权利要求1或2所述的含有低聚木糖的凝结芽孢杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：

在S6中，在S5的酶解液中添加0.25％～0.5％的碳酸钙，搅拌时喷雾干燥进风温度180℃，出风温度80℃～90℃。